【摘 要】
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利用抑制消减杂交技术构建鹅就巢与产蛋cDNA基因文库,旨在筛选产蛋鹅上调与下调表达的基因。以就巢期和产蛋期鹅卵巢组织互为实验子和驱动子,进行正反双向消减杂交,获得鹅卵
【机 构】
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中国农业科学院家禽研究所; 江苏省苏州市乡韵太湖鹅有限公司;
【基金项目】
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国家科技支撑计划项目(2008BADB2B08);江苏支撑计划(BE2010370);现代农业产业技术体系建设专项资金(nycytx-42-G1)
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利用抑制消减杂交技术构建鹅就巢与产蛋cDNA基因文库,旨在筛选产蛋鹅上调与下调表达的基因。以就巢期和产蛋期鹅卵巢组织互为实验子和驱动子,进行正反双向消减杂交,获得鹅卵巢差异表达基因文库。从双向文库随机挑选单菌落进行PCR验证,结果表明文库质量良好。选取654个阳性克隆进行测序分析,获得641条表达序列标签(ESTs)。对ESTs进行去除载体序列、质量检测、聚类及拼接,经BLASTn比对,有166条ESTs找到与之匹配的同源序列,其中92个是功能基因。比较就巢与产蛋SSH文库,发现产蛋特异性基因文库中参与物质能量代谢、细胞防御的基因较多;尚有许多差异片段属于未知功能蛋白或理论推定蛋白。该结果对进一步研究鹅卵泡发育及繁殖力分子标记筛选打下了基础。
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