不同剂量猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗肌肉注射诱导小鼠细胞免疫的研究

来源 :中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhml0726
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猪繁殖与呼综合征病毒(PRRSV)0RF5基因疫苗(pcDNA-PRRSV-ORF5)以50μg、100μg和200μg三种剂量肌注免疫BALB/c小鼠,以PBS和空载质粒pcDNA为对照,采用流式细胞仪(FACS)、淋巴细胞增殖试验(MTT法)分别对小鼠外周血中CD4+、CD8+T淋巴细胞数和淋巴细胞的转化功能进行检测.结果表明,三个剂量的pcDNA-PRRSV-ORF5基因疫苗接种小鼠后外周血都对ConA有明显的反应性,实验组与对照组比较差异极显著(P<0.01)或显著(P<0.05),CD4+T淋巴细胞数在免疫后7天高于对照组(P<0.01),CD8+T淋巴细胞在免疫后28天高于对照组,大剂量基因疫苗免疫小鼠的细胞免疫应答高于中、小剂量.结果表明,pcDNA-PRRSV-ORF5基因疫苗免疫小鼠能够诱导其机体产生良好的细胞免疫应答,并表现一定的剂量依赖性.
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利用原位末端标记(TdT-mediateddUTPnickandlabeling,TUNEL)方法检测猪繁殖与呼吸综合征(Porcinereproductiveandrespiratorysyndrome,PRRS)病毒感染仔猪后所产生的凋亡,8h即可检测到细胞凋亡,30h即发生明显的细胞凋亡,且凋亡细胞数目在感染第七天达到高峰,第七天以后逐渐减少,至感染后42天时仍能检测到少量凋亡细胞.PRRS
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将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因疫苗pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5分别以6μg基因枪轰击以及200μg、100μg+100μgpcDNA-IL-2、100μg和50μg肌肉注射的方法免疫BALB/c小鼠,免疫后不同时间分别取各组BALB/c小鼠胃、肠、肝、脾、肾、心、肺、免疫部位肌肉和脑等组织器官.通过PCR检测基因疫苗在BALB/c小鼠体内的分布规律,结果表明:于免疫
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将猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSVORF5基因疫苗pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5分别用6μg基因枪轰击和200μg、100μg+100μgpcDNA-IL-2、100μg、50μg肌肉注射的方法免疫BALB/c小鼠,于免疫后不同时间取免疫部位肌肉、肠、肝、脾、肾、心肌、肺脏和脑等组织器官,多聚甲醛固定,石蜡包埋.用原位PCR检测基因枪轰击和肌肉注射免疫后不同时间PRRSVORF5基因疫苗
将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因疫苗pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5分别以6μg基因枪轰击以及200μg、100μg+100μg猪白介素2真核表达质粒(pcDNA-IL-2)、100μg和50μg肌肉注射的方法免疫BALB/c小鼠,免疫后不同时间分别取各组BALB/c小鼠肠、肝、脾、肾、心、肺、免疫部位肌肉和脑等组织器官.多聚甲醛固定,石蜡包埋.以蔗糖密度梯度离心法提纯的
猪繁殖与呼综合征病毒ORF5基因疫苗(pcDNA-PRRSV-ORF5)以不同免疫途径(基因枪和肌肉注射)免疫BALB/c小鼠,以PBS和空载质粒pcDNA3.1(+)为对照,采用流式细胞仪(FACS)、淋巴细胞增殖试验(MTT法)及间接ELISA试验分别对小鼠外周血中CD4+、CD8+T淋巴细胞数、T淋巴细胞的转化功能及小鼠血清中特异性PRRSV血清抗体IgG动态变化进行了检测.结果表明,pcD
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