传统的总黄酮测定方法多为亚硝酸钠-硝酸铝比色法,该方法易受溶液中其它物质尤其是多酚类物质的影响,造成结果偏高。本文基于黄酮类化合物能与铝离子络合形成具有荧光的络合物的特性,以芦丁为标准物,建立起利用荧光法测定金银花叶中总黄酮含量的方法。通过优化得到反应最佳条件,并测量得到线性方程和检测限、定量限。对金银花叶中黄酮的含量进行测定,并测定加标回收率。结果表明,反应最佳条件为:pH=3.6醋酸缓冲溶液,5%硝酸铝加入量为4 mL,使用95%乙醇水溶液定容后30 min进行荧光测量。在芦丁质量浓度为0~0.16 mg/mI范围内反应体系荧光值随芦丁质量浓度的增加呈线性关系,检测限及定量限分别为0.056 g/mL和0.171 g/mL,对5份金银花叶样品中的总黄酮含量进行测定,其平均含量为2.314 mg/g,RSD为5.10%,加标回收率在92.1%~104.3%之间。与比色法相比,荧光法具有的更低的检测限和定量限,且各物质对其的干扰更小,方法简便快速,可将荧光法替代传统的比色法用于其它物质总黄酮含量的测定中。