目的:寻找新的肿瘤相关抗原和具有临床价值的分子标记物,并研究该分子标记物在不同肿瘤发生发展中的作用,探究其表达水平与结直肠癌、乳腺癌两种肿瘤患者生存预后的关联 。 方法:通过噬菌体展示肽库筛选与结直肠癌患者血清中抗体特异性结合的多肽,根据同源性分析和三维结构模拟获得抗原蛋白并制备其抗体.通过免疫组化检测结直肠癌与乳腺癌患者中该蛋白的表达水平,用Kaplan-Meier曲线和Cox多因素风险模型判断其表达的临床意义.通过噬菌体展示肽库筛选、蛋白质免疫共沉淀寻找并鉴定该蛋白的相互作用蛋白,通过慢病毒感染或质粒转染干扰或过表达该蛋白,并通过基因表达谱分析、Realtime RT-PCR、染色质免疫共沉淀、双荧光素酶报告基因实验、Western Blot等技术研究该蛋白在肿瘤发生发展中的作用机制。 结果:通过噬菌体肽库筛选获得多肽VPLYSNTLRYGF,其对应蛋白为乙酰转移酶Naal0p;用制备获得的特异性单抗通过免疫组化检测发现,Naalop在结直肠癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织,是预后不良的独立危险因素;Naalop在乳癌组织中的表达也显著高于癌旁正常组织,但Naalop低表达是预后不良的独立危险因素.在肠癌细胞RKO及非小细胞肺癌细胞H1299中,Naalop能够增强细胞的集落形成能力和裸鼠成瘤能力,同时增强其对诱导凋亡的耐受性,其机制与Naalop能作为转录辅助因子与p65相互作用并使其乙酰化,从而促进p65下游抗凋亡基因MCL1的转录有关;同时发现Naalop可以与28S蛋白酶体亚基PA28β相互作用,通过下调28S蛋白酶体活性增强RKO与H1299的集落形成能力.而在乳癌细胞系中,Naalop能显著减弱癌细胞的集落形成能力,抑制乳癌细胞的迁移侵袭和在裸鼠体内的成瘤和转移,其机制与Naalop能通过和STAT5a相互作用降低其与转移相关基因ID1启动子区的结合,进而下调ID1基因的转录有关:Naalop还能通过与p65的相互作用抑制IL-1β的表达,下调JAK2、STAT5a的磷酸化从而下调ID表达,最终导致其下游的MMP2和MMP9表达下调,从而抑制肿瘤细胞的侵袭转移。 结论:通过噬菌体展示肽库筛选获得了肿瘤相关抗原Naal0p,其在不同肿瘤通过不同机制影响肿瘤细胞增殖、凋亡、转移.在结直肠癌中起促进肿瘤发生发展的作用,其高表达提示患者预后不良;而在乳腺癌中发挥抑制肿瘤转移的作用,其高表达提示患者预后良好。