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目的:建立实时荧光定量PCR(real time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)检测人外周血miR-223的方法,并比较miR-223在Graves病患者与健康对照外周血CD4+T细胞中的表达情况。方法:利用软件设计特异性的“颈环状”逆转录引物以及特异性的miR-223 PCR引物,建立和优化荧光定量PCR反应体系,评价该方法的特异性。最后根据△Ct法计算miR-223的相对表达量,比较20例Graves病患者与20例健康对照外周血miR-223的表达水平。结果:建立了人miR-223实时荧光定量PCR的检测方法,实验结果显示使用该方法扩增的miR-223的熔解曲线为单峰,且核酸电泳显示仅一条特异性条带。统计发现Graves病组外周血CD4+T细胞中miR-223的表达水平明显低于健康对照组。结论:成功建立了人miR-223实时荧光定量PCR的检测方法,Graves病患者外周血CD4+T细胞中miR-223的表达水平降低。