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[目的]:研制建立禽流感病毒胶体金快速检测试纸条。
[方法]:对抗禽流感病毒核蛋白单克隆抗体进行胶体金标记,并喷涂于玻璃纤维上制成金标垫;用鸡抗禽流感病毒IgG和羊抗鼠IgG分别包被于硝酸纤维素(NC)膜上作为检测线和质控线,组装成禽流感病毒胶体金快速检测试纸条。
[结果]:试验结果表明,用所制备的试纸条检测H5、H7、H9亚型禽流感病毒标准抗原时,检测线出现明显的紫红色条带,而与其它禽类常见病毒无任何交叉反应:检测灵敏度比HA试验高出4倍以上,且具有操作简单、快速的特点,10分钟内就可判定结果。试纸条在室温保存6个月、4℃保存12个月其特异性及灵敏度没有明显变化。攻毒实验结果表明,试纸条在攻毒3天后即可检出病毒,达到了早期检测的要求。对实验室送检及临床采集共311份喉头拭子(有呼吸道症状的病鸡)进行检测,结果与本室研制的禽流感病毒ELISA诊断试剂盒符合率为100%,随机抽取10份试纸条检测阳性样品和30份阴性样品,经病毒分离及HI试验证明无一误检。
[结论]:本研究研制的禽流感病毒胶体金快速检测试纸条具有特异、敏感、稳定、操作简单快捷等特点,适合于禽流感病毒的现场检测。