【摘 要】
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近年来研究发现,骨细胞是骨组织中响应力学刺激的主要细胞,在骨基质中,骨细胞主要通过半通道与细胞外基质相连接,响应外界力学刺激并传递信号.Cx43(connexin43,连接蛋白43)是骨细胞中组成半通道最主要的连接蛋白.前期研究发现,抗磁悬浮环境培养MLO-Y4细胞3h能增加Cx43的表达(图1).本实验采用抗磁悬浮环境处理MLO-Y4细胞3h,同时加入特异性阻断半通道功能的Cx43(E2)抗体,
【机 构】
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空间生物实验模拟技术国防重点学科实验室,西北工业大学生命学院,陕西西安
【出 处】
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中国空间科学学会空间生命专业委员会第二十届学术研讨会暨中国宇航学会航天医学工程与空间生物学专业委员会第四届学术研讨会
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近年来研究发现,骨细胞是骨组织中响应力学刺激的主要细胞,在骨基质中,骨细胞主要通过半通道与细胞外基质相连接,响应外界力学刺激并传递信号.Cx43(connexin43,连接蛋白43)是骨细胞中组成半通道最主要的连接蛋白.前期研究发现,抗磁悬浮环境培养MLO-Y4细胞3h能增加Cx43的表达(图1).本实验采用抗磁悬浮环境处理MLO-Y4细胞3h,同时加入特异性阻断半通道功能的Cx43(E2)抗体,通过全基因组芯片研究抗磁悬浮环境处理对MLO-Y4全基因表达谱的影响,以及半通道在其中所起的作用.本实验分析结果显示共检测到基因35556个,其中已知基因占54%.抗磁悬浮环境对MLO-Y4细胞的基因表达无显著影响,仅有ROCK1,FOS以及FOSb等个别基因发生改变.但半通道阻断对MLO-Y4细胞的基因表达有明显影响(图2),约802个基因的表达发生了改变,其中包含一些骨代谢的标志性基因,如Mdm2,Ctsk,Ccl3,Col3a1,Tgfbr1,Il1r1,CD14,Il-6等,同时包括Wnt、TGF-β、细胞内钙等信号通路有明显的改变,涉及骨架重排、细胞凋亡和细胞增殖、破骨细胞分化和骨吸收等多个骨代谢相关的生物学过程发生了改变(表1).结果提示:1)阻断半通道引起了Tgfbr1表达及下游MAPK信号通路关键基因Ras和RSK2等的下调,NF-KB通路中受体Xiaop的表达也发生了下调.这些信号通路的改变可能影响了与破骨细胞分化及骨吸收等骨代谢相关基因的表达.2)阻断半通道后,泛素途径E1,E2,E3三个过程中均有一些重要基因如Mdm2等的表达量发生改变,这些基因的改变可直接调控P53信号通路,从而调控细胞凋亡等过程.3)阻断半通道后,细胞因子如Cxcl2,Ccl3,Cxcl9,Cxcl5下调,可能通过引起下游JAK2,Ras,Rock等细胞增殖分化相关基因表达量的下降,影向细胞的迁移过程.4) 阻断半通道引起细胞膜表面RTK、CD14表达量的增加,可能通过间接抑制Ras,Rock的表达,影响mDia以及PI4P5K等的表达,参与黏着斑的组装和骨架的重排.同时Wnt通路中ROCK基因的下调也可能影响下游黏着斑的改变以及微丝骨架的重排等过程.
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