菌丝体内麦角硫因的积累率及其浸提工艺研究

来源 :第七届中国工业生物技术发展高峰论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zengdf
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  麦角硫因(L-Ergothioneine,EGT)是一种稀有的天然左旋氨基酸类强抗氧化剂,更是一种多功能的细胞生理保护剂,在器官和细胞保存、医药、功能食品、化妆品和生物技术等领域具有良好的应用前景.蕈菌深层发酵生物合成EGT具有产量高、成本低、易实现规模化生产及产品安全等优势.蕈菌合成的EGT积累在菌丝体内,检测和提取EGT,首先要将EGT萃取或浸提到细胞外.文献采用低沸点的有机溶剂或热的NaOH溶液萃取EGT,不仅在操作过程中存在安全问题,更重要的是,要获得EGT产品,还必须去除人为添加的有害物质,增加了提取流程和提取成本.本文利用RP-HPLC技术测定了菌丝体浸提前后发酵液的离心上清液中EGT的含量,研究了菌丝体内EGT的水浸提工艺.糙皮侧耳深层发酵合成EGT,96.2 %的EGT积累在菌丝体内,有3.8 %的EGT渗透到了细胞外,证明了EGT在发酵过程中能够渗透到细胞外.仅以水作为浸提剂,通过单因子实验,研究了浸提的料水比、浸提温度、搅拌转数和浸提时间等因素.通过响应面设计实验,得到EGT水浸提工艺的优化因素组合:料水比为1:16 (g:mL),浸提温度89℃,搅拌转数200rpm,浸提时间10min,EGT的一次浸提率达到了96.4 %.与此前EGT的浸提技术相比,本文仅采用水作为浸提溶剂,替代了低沸点的有机浸提溶液.在浸提过程中不添加任何化学试剂和石油化工原料,浸提的原料成本最低.将该浸提工艺应用于EGT的研究与生产过程,不仅能避免操作过程中大量使用有机溶剂可能带来的危险,避免使用有机溶剂、无机化学品等对EGT产品的安全性造成的影响,简化提取工艺,降低提取成本,减少污染,而且减少有机溶剂浸提生产车间的建造和运行费用.
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