【摘 要】
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目的深入探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)对雌性大鼠颗粒细胞(GCs)凋亡的作用机制,阐明DEHP的卵巢毒性作用。方法将48只成年雌性Wistar大鼠随机排序分组法分为4个剂量
【机 构】
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海南医学院热带医学与检验学院; 吉林大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学教研室;
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(81573184)
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目的深入探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)对雌性大鼠颗粒细胞(GCs)凋亡的作用机制,阐明DEHP的卵巢毒性作用。方法将48只成年雌性Wistar大鼠随机排序分组法分为4个剂量组,即阴性对照组(玉米油)、低剂量组(300mg/kg/d,1/100LD50)、中剂量组(1000mg/kg/d,1/30LD50)、高剂量组(3000mg/kg/d,1/10LD50),每组12只。每天灌胃1次,每周连续6天,共4周。染毒结束后,于动情间期处死大鼠,分离卵巢GCs,采用Annexin V-FITC/PI双染法观察DEHP诱导GCs凋亡情况,利用分光光度法检测Caspase-3活性,Western Blot法测定凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2表达水平。HE染色法观察大鼠卵巢病理组织变化,放射免疫分析法测定血清中性激素水平,免疫组织化学染色法测定卵巢性激素受体表达情况,RT-PCR法检测卵巢性激素合成通路关键基因表达差异。结果 DEHP暴露能增加大鼠卵巢GCs凋亡率,增高Bax/Bcl-2比值,激活Caspase-3。延长大鼠动情周期持续时间;降低卵巢脏器系数,诱导卵泡闭锁。降低卵巢性激素合成通路关键基因和性激素受体表达水平,抑制性激素分泌。结论 DEHP能够通过诱导卵巢颗粒细胞凋亡,影响雌性大鼠生殖器官和生殖内分泌功能,产生卵巢毒性作用。
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