竞争性PCR定量检测马铃薯黑胫病

来源 :2012年中国马铃薯大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:anabaow1a1
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马铃薯黑胫病为马铃薯生产上一种危害严重的细菌种传病害,种薯携带黑胫病菌及带茵量是衡量种薯质量的一个重要指标,本研究开发了利用竞争性PCR技术对黑胫病茵进行定量检测的分子技术,该方法能对带菌黑胫病薯块进行快速定量检测,这为保证种薯质量提供了可靠的定量检测技术支撑.利用De Boer已报道的马铃薯黑胫病菌特异性基因,重新设计了马铃薯黑胫病菌上游引物Eca3f,与已知下游引物Eca2r组合进行PCR扩增,制备竞争性模板,并克隆构建内参照菌E.coli3f,进行竞争性PCR扩增.通过比较马铃薯黑胫病菌Eca与E.coli3f的扩增产物间的亮度来估计马铃薯黑胫病菌的数量.
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