【摘 要】
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本试验首先用PCR方法扩增出传染性法氏囊(IBDV)株VP2基因，将其克隆到T载体上，并进行了序列的分析。然后将其亚克隆到真核表达载体pcDNDTM4/His/LacZ中，并将该真核表达载体上的CMV启动子和增强子控制的含LacZ和VP2基因表达盒克隆入pUS2基因中，成功的构建了马立克氏病毒的转移载体。然后，通过脂质体方法转染已感染马立克氏病病毒的鸡胚成纤维细胞(CEF)中，用96孔板稀释法纯化
【机 构】
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北京市农林科学院畜牧兽医研究所 100089 中国农业大学动物医学院 北京市农林科学院畜牧兽医研究
【出 处】
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北京畜牧兽医学会成立五十周年庆典暨北京畜牧兽医学会第八届会员代表大会学术研讨会
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本试验首先用PCR方法扩增出传染性法氏囊(IBDV)株VP2基因，将其克隆到T载体上，并进行了序列的分析。然后将其亚克隆到真核表达载体pcDNDTM4/His/LacZ中，并将该真核表达载体上的CMV启动子和增强子控制的含LacZ和VP2基因表达盒克隆入pUS2基因中，成功的构建了马立克氏病毒的转移载体。然后，通过脂质体方法转染已感染马立克氏病病毒的鸡胚成纤维细胞(CEF)中，用96孔板稀释法纯化表达LacZ基因的重组CVl988病毒株，获得蓝色的重组病毒。该重组病毒通过PCR方法鉴定证实其基因组中含有完整的传染性法氏囊VP2基因。Western-blot实验证实重组病毒表达了传染性法氏囊、VP2蛋白。
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