锰致SH-SY5Y细胞线粒体自噬的机制研究

来源 :第六届亚洲特大城市环境与公共健康论坛暨中国环境科学学会环境医学与健康分会2015年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jianhua230747
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  目的 探讨锰作用于SH-SY5Y细胞后引起神经细胞线粒体自噬的机制,为锰神经毒性防治选择新的靶点.方法 SH-SY5Y细胞加入不同浓度(0、125,250,500,1000μmol/L)的Mncl2·(H2O)4,染毒24h后,用MTT法测定细胞存活率,Western blot检测LC3、P62等自噬及选择性自噬相关蛋白表达量,MDC染色法观察细胞自噬体的形成,及利用流式细胞术检测细胞膜电位变化情况.结果 MTT结果显示,与对照组相比,锰染毒组细胞存活率明显降低(P<0.05),且呈明显的剂量反应关系(P<0.05).并于1000μmol/L染毒剂量处细胞存活率达(78±0.09)%.MDC染色法表明与对照组相比,处理组发生自噬体数量明显增多.LC3、beclin-1蛋白表达量在250μmol/L之前随染毒剂量的增加而增加与250μmol/L处达到最大之后逐渐减少(P<0.05).流式细胞术检测随着染毒浓度的增加,细胞膜电位逐渐降低.结论 Mncl2·(H2O)4可通过增加LC3、beclin-1的表达量促进SH-SY5Y细胞线粒体自噬发生.
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