【摘 要】
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草鱼是我国淡水养鱼的主要品种,其产量约占淡水养殖总产量的20％;而草鱼出血病是危害草鱼最为严重的病毒性疾病,造成巨大经济损失.草鱼出血病疫苗品质与草鱼出血病的防控效果戚戚相关.本研究主要从病毒接种、病毒生长、病毒转瓶培养、病毒纯化等草鱼出血病弱毒活疫苗生产工艺和检测用多克隆抗体的制备等方面进行介绍.结果表明:在75cm2方瓶和15L转瓶上,接种病毒为0.01-0.03 TCIDso/每个细胞时,4
【机 构】
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华南农业大学兽医学院,广东省广州市,510642;农业部动物疫病防控生物技术与制品创制重点实验室,肇庆大华农生物药品有限公司,广东省肇庆市大旺国家经济开发区,广东省肇庆市 526238
【出 处】
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第五届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会2014年学术年会、中国畜牧兽医学会生物制药学分会暨中国微生物学会兽医
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草鱼是我国淡水养鱼的主要品种,其产量约占淡水养殖总产量的20％;而草鱼出血病是危害草鱼最为严重的病毒性疾病,造成巨大经济损失.草鱼出血病疫苗品质与草鱼出血病的防控效果戚戚相关.本研究主要从病毒接种、病毒生长、病毒转瓶培养、病毒纯化等草鱼出血病弱毒活疫苗生产工艺和检测用多克隆抗体的制备等方面进行介绍.结果表明:在75cm2方瓶和15L转瓶上,接种病毒为0.01-0.03 TCIDso/每个细胞时,4-5天细胞病变90％以上,病毒滴度能够达到108.OTCID50/0.ImL以上.病毒培养液经过膜包浓缩、Sepharose 6 fast flow层析、DEAE离子交换层析等步骤后,病毒的回收率达到55％,杂蛋白去除达到90％.使用纯化的病毒制备多克隆抗体,通过CIK细胞碎片吸附后,明显降低其对CIK细胞的毒性, ELISA检测,抗体可以稀释100万倍,并能够中和108.OTCID50/O.lmL的病毒液.结论:本文初步探讨了草鱼出血病病毒的繁殖、纯化、多克隆抗体制备,为其它病毒纯化和多克隆抗体制备提供了参考.
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