【摘 要】
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用KM2培养基(含马血清)培养猪肺炎支原体(Mhp)ZCF23株.高速离心收获培养物并用PBS悬浮,经反复冻融裂解后作为免疫原,腹腔注射免疫BALB/c小鼠.利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得了5株分泌特异性抗体的单克隆细胞株,分别命名为:11C6、14C11、11B6-1、10C11-2和12E7-1.生物学特性鉴定表明,五株腹水单抗的间接ELISA效价均在1:10000左右;免疫球蛋白亚类均为IgG
【机 构】
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扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室;扬州大学生物科
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用KM2培养基(含马血清)培养猪肺炎支原体(Mhp)ZCF23株.高速离心收获培养物并用PBS悬浮,经反复冻融裂解后作为免疫原,腹腔注射免疫BALB/c小鼠.利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得了5株分泌特异性抗体的单克隆细胞株,分别命名为:11C6、14C11、11B6-1、10C11-2和12E7-1.生物学特性鉴定表明,五株腹水单抗的间接ELISA效价均在1:10000左右;免疫球蛋白亚类均为IgG<,3>.免疫印迹结果表明,五株单抗所针对的抗原表位在90kD、40kD、70kD和60kD左右,而且不与马血清蛋白反应,说明以上单抗均是针对Mhp蛋白的特异性单克隆抗体.
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通过小白鼠生物过滤方法从重庆地区仔猪水肿病流行病例中分离到一株溶血性大肠杆菌,经毒力试验证明该菌对小白鼠LD小于3×10个/0.5mL,经0.2mg/mL硫酸多粘菌素B作用的细菌悬液,除菌过滤后能使小白鼠发生典型的后肢瘫痪等毒素后效应症状;分别用SLT-IIV/B引物(P1,P2)和fedA(P3,P4)引物以分离菌悬液为模板,能扩增出约200bp和500bp的特异核酸片断;经培养特性、生化试验以
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