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目的铅在环境中普遍存在,在我国儿童铅暴露问题十分严峻。低剂量铅暴露影响神经系统,造成神经递质紊乱、使神经元受损凋亡、诱导神经细胞氧化应激,并且影响神经胶质细胞功能,从而损伤神经元。关于铅对神经胶质细胞的毒性影响研究不多,本研究的目的是研究铅暴露对原代小胶质细胞和原代星形胶质的细胞毒性反应差异,初步探讨核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor2,Nrf2)分子在铅诱导小胶质细胞的氧化应激反应中的作用及机制。方法 1.分离并纯化原代小胶质细胞和原代星形胶质细胞;2.以不同浓度的醋酸铅溶液(5,15,30,50,100,250,500μmol/L)处理两种细胞24h后,CCK-8检测细胞增殖能力,为后续实验选取合适的浓度;3.ICP-MS检测两种细胞内的铅含量;4.共聚焦显微镜、GSH试剂盒检测细胞ROS、GSH水平;蛋白质免疫印迹法检测Nrf2蛋白水平。5.Nrf2敲低后,30μmol/L醋酸铅溶液处理原代小胶质细胞24h,CCK-8检测细胞增殖改变。6.Nrf2敲低后,30μmol/L醋酸铅溶液处理原代小胶质细胞24h,qPCR检测血红素加氧酶1(hemeoxygenase 1,HO-1)、醌氧化还原酶(quinine xidoreductase 1,NQO1)转录水平,蛋白质免疫印迹法检测Nrf2、HO-1、NQO-1蛋白水平;共聚焦显微镜检测细胞ROS水平;Nrf2强诱导剂tBHQ处理后铅诱导原代小胶质细胞,检测Nrf2、HO-1、NQO-1蛋白水平以及ROS水平改变。结果 1.与原代星形胶质细胞相比,原代小胶质细胞对低浓度铅处理更加敏感;2.原代小胶质细胞在低浓度的铅处理下发生明显的氧化应激作用,细胞内ROS增加,GSH减少,抗氧化相关蛋白Nrf2增加,而原代星形胶质细胞细胞变化不明显;3.Nrf2蛋白分子参与了铅诱导原代小胶质细胞氧化应激的过程。结论铅处理原代小胶质细胞和原代星形胶质细胞毒性具有明显差异,其中原代小胶质细胞对铅暴露更加敏感,并发生明显氧化应激作用,Nrf2分子可能参与了该过程。