【摘 要】
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目的：构建人Persephin基因重组腺病毒载体并观察其在C17.2神经干细胞的表达,以研究Persephin的过表达对神经干细胞生长及分化的影响以及治疗帕金森病的作用。方法：用逆转录聚合酶链式反应(PCR)法从人胚胎脑获得Persephin cDNA。将重组质粒pAdTrack-CMV-Persephin与骨架质粒pAdEasy-1共转染大肠杆菌BJ5183,获得重组腺病毒质粒。将重组腺病毒质粒
【机 构】
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广东省中山大学附属第二医院神经科 广东省中医院神经科
【出 处】
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第六次全国中西医结合神经科学术会议
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目的：构建人Persephin基因重组腺病毒载体并观察其在C17.2神经干细胞的表达,以研究Persephin的过表达对神经干细胞生长及分化的影响以及治疗帕金森病的作用。
方法：用逆转录聚合酶链式反应(PCR)法从人胚胎脑获得Persephin cDNA。将重组质粒pAdTrack-CMV-Persephin与骨架质粒pAdEasy-1共转染大肠杆菌BJ5183,获得重组腺病毒质粒。将重组腺病毒质粒转染293细胞包装获得重组腺病毒AdCMVPersephin,转化体外培养的C17.2神经干细胞。用原位杂交、免疫组化、Western blot法检测Persephin在C17.2神经干细胞中的表达。
结果：用RT-PCR法从人胎脑成功克隆了人Persephin cDNA,构建了其腺病毒载体,重组腺病毒AdCMVPersephin在293细胞中成功包装。重组腺病毒转染神经干细胞后有稳定表达。
结论：成功克隆人Persephin cDNA并构建其腺病毒载体,获得了稳定表达Persephin的神经干细胞克隆,为进一步研究转基因神经干细胞治疗神经退行性疾病的作用提供了条件。
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