两种杀螨剂诱导后柑橘全爪螨三种主要解毒酶生化特性研究

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柑橘全爪螨Panonychus citri(McGregor)又名柑橘红蜘蛛,是橘园三大害螨之一,常年发生于我国各大柑橘产区,造成严重经济损失。其寄主涵盖柑橘在内的112种植物。对于柑橘全爪螨的防治,目前仍以使用化学农药为主。随着橘园中化学农药的大量、持续、不合理使用,就不可避免地导致其抗药性越来越严重。现已证明,昆虫(螨)体内主要解毒酶系[细胞色素P450(P450s),谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)和羧酸酯酶(CarE)]代谢能力的增强是昆虫(螨)对多种杀虫(螨)剂产生抗性的主要原因。本研究通过叶碟浸渍法对柑橘全爪螨北碚种群进行阿维菌素、螺螨酯的敏感性测定,通过SPSS分析,得到LC30分别为0.130mg/L和0.538mg/L。利用两种杀螨剂亚致死浓度LC30对柑橘全爪螨北碚种群进行24h诱导,对照为双蒸水处理,进行酶液提取。P450s、GSTs、CarE酶活测定采用微量酶标板法。结果表明,阿维菌素诱导后,GSTs比活力显著提高(P<0.05),为对照的4.18倍,而细胞色素P450和CarE的比活力同对照相比均无显著性差异(P>0.05)。经螺螨酯诱导后,三种代谢酶比活力分别为P450s:38.19(EU ofP450)/mg;GSTs:248.83nmol/(min·μg);CarE:5.36 nmol/(min·μg)。其中,处理组P450s的比活力显著高于对照组(P<0.05),处理组GSTs的比活力是对照组的2.13倍,但无显著性差异(P>0.05),同样CarE的比活力没有显著性变化(P>0.05)。综上,说明GSTs对阿维菌素的代谢起到重要作用,而柑橘全爪螨对螺螨酯的抗性形成则可能与细胞色素P450和GSTs有关,其中P450s起主导作用。今后将通过分子生物学方法对代谢酶基因表达模式进行全面解析,并结合异源表达,将使柑橘全爪螨代谢抗性机理的研究迈上新的台阶。
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