【摘 要】
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椰子泻血病是海南椰子树的重大病害，其病原为奇异长喙壳菌(Ceratocystis paradoxa)。通过溶壁酶酶解菌丝体成功制备奇异长喙壳菌原生质体，用抗潮霉素基因作为选择标记，采用P
【机 构】
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中国热带农业科学院椰子研究所,海南省热带油料作物研究中心,文昌571339
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椰子泻血病是海南椰子树的重大病害，其病原为奇异长喙壳菌(Ceratocystis paradoxa)。通过溶壁酶酶解菌丝体成功制备奇异长喙壳菌原生质体，用抗潮霉素基因作为选择标记，采用PEG介导的原生质体转化法，用绿色荧光蛋白表达载体(pCT74-sG-FP)转化原生质体，获得表达GFP奇异长喙壳菌的转化子菌株；转化子菌株在含潮霉素平板上经多次纯化后，在无选择压下连续继代培养仍能发出稳定而强烈的绿色荧光。用GFP特异性引物PCR扩增转化子菌株基因组DNA获得预期大小片段，表明外源基因已成功导入奇异长喙壳菌基因组中，且稳定遗传；GFP标记菌株生长正常，致病性和野生型菌株无明显差别。今后将利用该标记菌株，进一步研究奇异长喙壳菌在植物体内的侵染和扩增特性，为最终明确该病菌的致病机制奠定基础。
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