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目的：探讨碘化N-正丁基氟哌啶醇(F2)是否可通过调控LKB1/AMPK/ROS信号通路拮抗心脏微血管内皮细胞缺氧复氧损伤.方法 酶消化法分离新生SD大鼠心脏微血管内皮细胞并采用免疫细胞化学法进行鉴定.将培养的内皮细胞随机分为以下组别：对照(Control)组、Control+ROS清除剂N-乙酰基-L-半胱氨酸(Control+ NAC)组、缺氧复氧(H/R)组、H/R+ NAC组、H/R+F2组、H/R+F2+ AMPK抑制剂Compound C(H/R+F2+Com.C)组.建立制备缺氧液与氮气饱和相结合的方法建立内皮细胞H/R模型,不同浓度F2(10μM、1μ M、0.1μM)及信号通路工具药Compound C(5μM)、NAC(10mM)分别预给药处理或加至缺氧液、复氧液中.MTT法检测内皮细胞存活率、比色法测定培养细胞上清中乳酸脱氢酶(LDH)的漏出,以反映内皮细胞损伤程度.AnnexinV-FITC/PI双染法检测早期凋亡、TUNEL法检测晚期凋亡、比色法检测Caspase-3活性,以反映内皮细胞凋亡程度.荧光显微镜检测内皮细胞内ROS水平.Western-blot方法检测内皮细胞p-LKB1、LKB1、p-AMPK、AMPK蛋白表达的变化.结果 经差速贴壁纯化后的细胞用免疫细胞化学鉴定,CD31以及vWF阳性细胞达95％以上.F2能减轻H/R诱导的内皮细胞损伤,使凋亡程度减轻,LDH漏出减少,Caspase-3活性降低,细胞存活率升高.正常情况下,内皮细胞以10μmol/L的F2分别刺激O,30,60,120,180,240 min,F2可时效依赖性地增加LKB1、AMPK的磷酸化并在180 min时达到最高水平.固定刺激时间为180 min,F2可量效依赖性地增加LKB1、AMPK的磷酸化.此外,H/R可增加内皮细胞LKB1、AMPK的磷酸化,而F2可量效依赖性地增加H/R内皮细胞LKB1、AMPK的磷酸化水平.AMPK特异性抑制剂Compound C可拮抗F2对内皮细胞H/R损伤的改善作用,使内皮细胞存活率降低,LDH漏出增加,凋亡程度加重.F2可降低H/R内皮细胞中ROS含量,而Compound C可消除F2对ROS水平的改善作用,使内皮细胞中ROS含量增加.ROS特征性抑制剂NAC可减轻H/R损伤,使内皮细胞存活率升高,LDH漏出减少和细胞凋亡减轻.结论 F2可激活H/R内皮细胞LKB1/AMPK信号通路,减少ROS生成,进而减轻H/R损伤,这可能是其抗心肌I/R损伤的一个重要机制.