【摘 要】
：
目的：外部刺激会引起牙髓组织局部缺血和低氧,诱发修复反应,研究表明低氧影响损伤修复反应中牙髓干细胞(Dental pulp stem cells,DPSCs)的生物学行为,但相关机制尚不清楚,本研究旨在进一步探究低氧对DPSCs的作用机制.方法：应用二氯化钴(CoC12)模拟体外细胞低氧环境,借助MTT,克隆形成实验、茜素红染色、ALP活性检测、油红O染色、qPCR等比较DPSCs在常氧和低氧条件
【机 构】
：
军事口腔医学国家重点实验室,第四军医大学口腔医院牙体牙髓病科 陕西省口腔医学重点实验室
【出 处】
：
中华口腔医学会牙体牙髓病学专业委员会第五次全国牙体牙髓病学临床学术研讨会
论文部分内容阅读
目的：外部刺激会引起牙髓组织局部缺血和低氧,诱发修复反应,研究表明低氧影响损伤修复反应中牙髓干细胞(Dental pulp stem cells,DPSCs)的生物学行为,但相关机制尚不清楚,本研究旨在进一步探究低氧对DPSCs的作用机制.方法：应用二氯化钴(CoC12)模拟体外细胞低氧环境,借助MTT,克隆形成实验、茜素红染色、ALP活性检测、油红O染色、qPCR等比较DPSCs在常氧和低氧条件下的干性改变,并研究Notch信号通路在其中的作用.结果：低氧下hDPSCs增殖能力和克隆形成率显著增强(P＜0.05),干性分子Oct4和c-Myc表达明显上调(P＜0.05),但成脂和成骨/牙向分化能力减弱(P＜0.05),进一步的机制研究发现低氧下hDPSCs中Notch信号通路下游靶基因Hes1表达显著增加,阻断Notch通路后hDPSCs增殖与克隆形成率明显下降(P＜0.05),干性分子Oct4和c-Myc表达降低,成脂和成骨/牙向分化能力增强(P＜0.05),低氧对hDPSCs的促增殖和抑分化的作用被逆转,同时伴随Oct4和C-myc表达下降(P＜0.05).结论：结果提示低氧对牙髓干细胞有促进增殖,增强干性和抑制分化的作用；Notch信号通路参与维持DPSCs的干性；阻断Notch信号通路抑制了低氧对DPSCs的作用,表明低氧对牙髓干细胞增殖与分化的影响作用可能是与Notch信号通路的激活有关.
其他文献
目的：探讨二次胶原酶消化法进行小鼠牙囊细胞体外分离培养的可能性。方法：体视显微镜下分离出生后3～5天仔鼠牙胚,用Ⅰ型胶原酶37℃消化20分钟,分离牙囊组织,所得的牙囊组织采用Ⅰ型胶原酶在37C条件下进行二次消化1小时,常规接种培养细胞。倒置相差显微镜下进行细胞形态学的观察,细胞免疫化学染色鉴定组织来源。结果：二次酶消化法第二天可见散在细胞集落形成,4～5天细胞接触融合。采用二次酶消化法可获得约85
目的：观察强酸性电解质水对小鼠成纤维细胞L929的细胞毒性.方法：培养小鼠成纤维细胞L929细胞,采用MTT比色法,分别以强酸性电解质水、17％ EDTA、5.25％ NaOCl、0.9％生理盐水作为实验组,生理盐水为对照组,每组以10倍、100倍、1000倍、10000倍、100000倍五个浓度稀释,分别在6小时、12小时、24小时、48小时四个时间点观察其对L929细胞的细胞毒性.结果：在强酸
患者,男,35岁,"上前牙牙龈肿痛一月余"就诊.上前牙曾于十年前受伤,后行根管治疗及烤瓷冠修复.近期反复肿痛不适.检查发现.11,21,22烤瓷联冠,叩痛(±),不松动.根尖片显示11,21,22根管内均有充填物,欠填欠密合,21根尖区低密度影,11,22根尖区未见明显阴影.经修复科,外科会诊,拆除联冠,拔除21,转入牙体牙髓科,试行11,22根管再治疗.拟后期行固定桥修复.再次检查,11,22叩
本病例为下颌第二磨牙C2型根管,其中,根管上段融合,于根尖三分之一处分开为独立的近舌根管与粗大的弧形带状根管;近舌根管细窄弯曲,治疗中应注意寻找,避免遗漏.患者,女,36岁,因右下后牙反复肿痛3个月就诊.查:47远中可见白色充填材料,叩痛(±),松动Ⅱ,颊侧牙龈近根尖处可见一窦道口,探指向根尖,PD 2～4mm,未及深牙周袋.X线片示47冠部远中低密度影及髓腔,C形根管影像,根尖周可见低密度影,边
目的：本实验主要探讨细胞自噬在树脂单体甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA)诱导的牙髓细胞凋亡和坏死过程中的作用.方法：取18至22岁正畸患者的健康第三磨牙牙髓细胞原代培养,取第5至7代牙髓细胞用于研究.不同浓度(0～10mM)的HEMA分别作用于牙髓细胞12h,24h,48h,72h,CCK-8检测细胞毒性作用.Annexin V-PI染色的流式细胞术和Hochest 33342染色等实验检测HEMA诱导
目的：研究RECK,MMP-2在成釉细胞瘤中及根尖囊肿中的表达,探讨其在成釉细胞瘤中的发生发展中的作用.方法：应用免疫组化SP法检测40例成釉细胞瘤,16例根尖囊肿RECK、MMP-2的表达.结果：RECK在成釉细胞瘤中低表达(30％),并随成釉细胞瘤的复发而降低(P＜0.05).RECK在根尖囊肿中高表达(68.75％).MMP-2在成釉细胞瘤中高表达(82.5％),并随成釉细胞瘤的复发而增高(
目的：对牙本质的亲和性是根管内消毒材料的一个重要特性.本次研究的主要目的是研究Ag-Ca-Si介孔纳米材料(Ag-MCSNs)对牙本质的亲和性以及在牙本质上对粪肠球菌的抗菌作用.方法：制备以及表征Ag-MCSNs材料,并测试其离子释放和相应的PH值,评估其对浮游粪肠球菌的抑制作用及细胞毒性.分别用Ca(OH)2糊剂,2％洗必泰凝胶及Ag-MCSNs糊剂敷在牙本质片上7天,之后用双蒸水冲洗.冲洗过的
目的：比较难治性根尖周炎粪肠球菌临床分离株的生物膜形成能力，生长曲线，耐酸碱能力及表型差异；探讨其检出与临床症状的关系.方法：收集临床样本57例，按照临床症状分入疼痛组、肿胀组、窦道组和无症状组.以26株分离、鉴定粪肠球菌临床株为实验菌株，粪肠球菌标准菌株V583为对照菌株，采用96孔微板法结合结晶紫染色，酶标仪定量测定各菌株体外生物膜形成量.应用细菌计数法及OD值法绘制各菌株生长曲线.检测不同p
目的：探讨ITGA5对hDPSCs迁移能力的调控作用,为进一步阐明牙髓组织的损伤修复、再生机制提供理论依据.方法：酶消化法分离人牙髓干细胞,构建抑ITGA5表达的慢病毒载体,Realtime-PCR验证搭载ITGA5 shRNA的慢病毒感染hDPSCs的有效性.Transwell实验检测抑制ITGA5表达对hDPSCs迁移能力的影响.结果：搭载ITGA5 shRNA的慢病毒可以高效率感染hDPSC
目的：比较正常牙髓干细胞、炎症牙髓干细胞及LPS处理的正常牙髓干细胞炎症因子的表达情况,碱性磷酸酶活性,及成牙/成骨分化相关蛋白基因的表达,检测炎症牙髓干细胞生物学行为的改变.方法：酶消化法及有限稀释法分离培养多克隆来源的正常牙髓干细胞及炎症牙髓干细胞,α-MEM培养,细胞角蛋白(CK)、波形丝蛋白(Vimentin)免疫荧光染色,验证其间充质干细胞特性.实时定量逆转录聚合酶链式反应实验(Real