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目的:探索小鼠骨髓耐受性树突状细胞(tolerogenic dendritic cell,tDCs)缓解小鼠免疫性血小板减少症(ITP)的机制.
方法:取小鼠的骨髓细胞作为DC的前体细胞,加入rmGM-CSF,rmlL-4,rmIL-10,rhTGFβ1等细胞因子培养6d,得到小鼠tDC,加入GPIIb培养后,得到GPIIb特异性tDCs,用于下面实验.将ITP小鼠脾脏分离来的CD4+CD25-T细胞与tDC共培养,流式细胞仪检测T细胞的表型变化并同时Elisa检测共培养上清中细胞因子IFN-γ、IL-10、TGF-β的分泌;将与tDC共培养6d后的T细胞与来自自体的脾淋巴细胞共培养,检测混合淋巴细胞反应及上清中细胞因子IFN-γ、IL-10、TGF-β的含量;分别检测接受PBS治疗的ITP小鼠和接受GPIIb特异性tDC治疗的ITP小鼠外周血中CD4+CD25+T细胞的数目及Foxp3和CD69的表型;应用抗鼠GPIIb抗体进行小鼠ITP造模,将小鼠模型分成两组,一组于抗体注射1h后注射接受GPIIb特异性tDC治疗的ITP小鼠外周血中的CD4+CD25+T细胞,另一组于抗体注射1h后注射PBS,分别在第0、1、3、24、48、72、96、120h检测两组小鼠的血小板计数、血清中IFN-γ的表达水平.
结果:ITP小鼠体内的CD4+CD25-T细胞在体外被tDC诱导为CD4+CD25+T细胞,其上清中含有较低含量的IFN-γ和较高含量的IL-10、TGF-β。
结论:GPIIb特异性tDC能够治疗ITP可能是通过诱导CD4+CD25+T细胞来实现的。