【摘 要】
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从人的乳腺组织中克隆了人乳铁蛋白(hLF)cDNA,其DNA序列与GenBank中另外4个hLF cDNA序列具有高度的同源性(同源性达到99％).将人乳铁蛋白cDNA克隆在质粒pBacPAK8的BamHI位
【机 构】
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浙江大学生物化学研究所 杭州 310029
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从人的乳腺组织中克隆了人乳铁蛋白(hLF)cDNA,其DNA序列与GenBank中另外4个hLF cDNA序列具有高度的同源性(同源性达到99％).将人乳铁蛋白cDNA克隆在质粒pBacPAK8的BamHI位点和Xho I位点,构建成重组转移质粒pBacPAK-hLF.该质粒DNA与已线性化Bac PAK6 DNA共转染家蚕细胞BmN,在培养的贴壁细胞中挑出空斑,经过3轮纯化,获得重组病毒BmN-PV-hLF.蛋白质免疫印迹法检测到在重组病毒感染的家蚕细胞中存在人乳铁蛋白基因的表达产物,相对分子质量约为78kD,ELISA法测定结果表明：家蚕细胞中重组人乳铁蛋白(rhLF)相对表达量在表达144h达到最高值,约为13.5mg/L.体外生物活性试验表明重组hLF对大肠杆菌JM109具有抑菌活性.
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