【摘 要】
：
目的通过筛选含有肝癌特异性表达基因启动子中的关键模体(motif),为今后制备肝癌靶向性重组启动子奠定基础。方法首先通过生物信息学方法分析获得甲胎蛋白(AFP)、Dickkopf-1(
论文部分内容阅读
目的通过筛选含有肝癌特异性表达基因启动子中的关键模体(motif),为今后制备肝癌靶向性重组启动子奠定基础。方法首先通过生物信息学方法分析获得甲胎蛋白(AFP)、Dickkopf-1(DKK1)、高尔基体蛋白73(GP73)、丛生蛋白(Clusterin)的启动子序列,并设计特异性引物;其次以人肝癌细胞基因组为模板,PCR扩增目的片段;再将扩增获得的基因片段其定向克隆到pCB-EGFP绿色荧光蛋白表达载体中,构建重组质粒:AFPppEGFP、CLUp-pEGFP、DKK1p-pEGFP、GP73p-pEGFP,转化至E.coli DH5α感受态细胞中。最后,将克隆出的质粒基因进行测序,再使用三种软件Promoter Scan、Plantcare和MEME对基因进行分型找出关键模体。结果质粒PCR与双酶切验证表明目的片段已克隆到pCB-EGFP载体上,通过测序结果比对发现肝癌细胞中几种特异性表达因子的启动子中存在多个突变位点。结论成功构建含有特异性表达基因启动子的质粒载体:AFPp-pEGFP、CLUppEGFP、DKK1p-pEGFP、GP73p-pEGFP,分析得出5个待验证的关键模体:GTCAT、CTCC、TTTTCT、AGGCAG、GCCGGG。
其他文献
近年来,湖南省各级民政部门坚持以社区服务型党组织建设为引领,推动社区基层政权建设,创新社区治理方式,提高社会治理水平,涌现出了一大批善于创新、成效显著的国家级示范单
本文介绍了国内外镀膜抗菌玻璃技术发展状况,国内研究生产镀膜抗菌玻璃的技术现状和产品分类。
从江苏省苏州市社会组织促进会一届五次理事会会议暨一届三次会员大会上获悉，2013年，苏州市社会组织促进会精心设计了“公益五彩桥”项目，为经济类社会组织所属会员税收优惠政策
加氧灌溉是通过灌溉水中加氧,使用直接往作物根系输氧的措施来实现根域气体环境的优化,促进作物生长,从而获取农作物增产增收的极为节水、节能与利于环境的最新灌溉技术。在
目的探讨总结股前外侧肌皮瓣修复足踝侧方软组织合并内、外踝缺损中重建关节稳定性的疗效和作用。方法总结20年间13例应用股前外侧肌皮瓣修复治疗后随访,从患者主观感受和影
日前，广西壮族自治区十二届政府第26次常务会议审议并原则通过《广西壮族自治区关于推进政府购买服务工作的实施意见》（以下简称《意见》）。《意见》明确，从今年开始，广西将按照“
当今世界,随着环境污染的加剧,水资源被破坏,直接影响到了人类的生活。减少水资源的浪费,节约回收污染水资源,使水资源可持续发展,是当今世界一个重要的课题。本课题以国家推进“水十条”为契机,针对我们国家大多数供水企业排泥水不处理直接排放的现状,研究典型自来水厂生产废水的处理及回收方法,寻求方法更好、费用更低、运行更稳定的净水厂生产废水处理工艺。本文以江苏江南水务澄西水厂为研究对象,系统分析了澄西水厂工
民政部网站日前发布关于云南鲁甸6．5级地震抗震救灾捐赠活动的公告，进一步规范救灾捐赠活动和志愿服务。
作为新疆乃至我国西部规模最大、影响力最强、覆盖面最广的农机盛会，2017年新疆农机博览会于8月13—15日在首府乌鲁木齐市新疆国际会展中心隆重召开，展会由中国农业机械流通协
山西省民间组织管理局近日在晋中市举办第一期非公募基金会下延培训班。太原、晋中、阳泉、吕梁4个地市48个县（区）的96名基层社会组织管理人员参加了培训。