微囊藻毒素和雌二醇对HepG2细胞联合毒性的预测和评价

来源 :2016(第二届)毒性测试替代方法与转化毒理学(国际)学术研讨会暨有害结局路径(AOP)与风险评估培训会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yztc_yztc
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  目的 微囊藻毒素(MC-LR)是一种肝毒素,国内外已有大量研究报导关于其体内外毒性。现有文献只是单纯研究MC-LR对细胞、组织以及器官的毒性效应,并未考虑环境的干扰,关于MC-LR与水体中其它广泛存在的污染物如雌二醇(EST)相互作用而引起的细胞毒性效应变化的相关研究甚少。本研究旨在基于浓度加和模型(CA)、独立作用模型(IA)和联合指数(CI)三种联合模型评价微囊藻毒素和雌二醇在水体中的联合毒性。方法 运用细胞毒性方法分析MC-LR和EST联合染毒。采用CCK-8比色法研究MC-LR和EST联合染毒对HepG2细胞的细胞活性影响;运用酶标仪,DCFH-DA(2-,7-dichlorodihydrofluorescein)作为荧光探针,对MC-LR和EST单独及联合染毒对HepG2细胞ROS含量进行检测;运用流式细胞检测仪检测MC-LR和EST单独及联合染毒对HepG2细胞早期凋亡和晚期凋亡的影响。基于细胞毒性分析方法,采用浓度加和模型(CA)、独立作用模型(IA)和联合指数(CI)三种联合模型定量分析联合作用类型。结果 单独染毒时MC-LR和EST都表现计量效应关系,在不同水平下呈现不同的毒性效应,即在低剂量或低浓度时(1×10-12-1× 10-9 g/mL)表现为促进HepG2细胞生长,而在高剂量或高浓度时(1×10-9-1× 10-6)则抑制HepG2细胞生长。二元混合物在不同浓度水平也呈现不同的毒性效应,并不完全符合CA/IA模型。采用CA、IA模型进行联合毒性预测时, IA模型更趋近实际检测点。采用CI模型对产生协同效用的MC-LR和EST的浓度范围进行验证,表明MC-LR和EST在较高浓度范围内(1×10-9-1×10-7)呈现协同效应。结论 水体MC-LR与污染物共存时的联合污染是一个很复杂的问题,其联合毒性效应不仅与污染物的组成有关,还与测试系统和暴露时间,暴露剂量有关。因此,当多种水体污染物共存时,可能发生复杂的联合毒性效应,只用单一藻毒素含量去评断水体污染后的毒性危害是不切实际的。为了能够准确的评价MC-LR在环境中的毒性作用、剂量-效应特征、毒性机制等,需要综合考虑MC-LR与环境中的其它污染物的联合作用。
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