【摘 要】
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表达猫杯状病毒表壳蛋白抗原表位并检测其免疫反应原性。应用RT-PCR技术从FCV病毒F81细胞培养物中提取病毒总RNA,克隆3端保守区,再用特异PCR扩增目的基因,将其亚克隆到pET-28
【机 构】
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广东省农科院兽医研究所,广东,广州,510640
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会
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表达猫杯状病毒表壳蛋白抗原表位并检测其免疫反应原性。应用RT-PCR技术从FCV病毒F81细胞培养物中提取病毒总RNA,克隆3端保守区,再用特异PCR扩增目的基因,将其亚克隆到pET-28a载体,构建pET-FCV表达载体。经酶切,PCR,测序鉴定。将阳性重组表达质粒转化E.Coli BL-21(DE3)菌,经IPTG诱导,表达产物用SDS-PAGE及Western-blot检测。阳性重组表达质粒转化E.coll BL21(DE3)后,经诱导表述了目的蛋白,表达量占菌体总蛋白的40％。Western blot检测表达蛋白可与FCV阳性血清发生反应。已成功表达了猫杯状病毒衣壳蛋白抗原表位,且具有良好的免疫反应原性。
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