【摘 要】
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为构建犬新孢子虫AMA1基因重组猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-Ⅰ)转移质粒pBS-TK-AMA1,并在真核细胞中表达,本试验以pBS-TK重组质粒为载体,插入犬新孢子虫AMA1基因.其中pBS-TK重组质粒是含有FHV-1TK基因的5(2000 bp)和3(1700 bp)同源臂、pCAGGs载体中含有启动子和终止信号的表达盒的pBluesciptⅡ-SK(-)载体.通过转染试剂PEI将pBS-TK-A
【机 构】
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延边大学农学院动物医学系 吉林 延吉 133002 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家
【出 处】
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第四届人畜共患病学术研讨会、2014年中国狂犬病年会、中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会
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为构建犬新孢子虫AMA1基因重组猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-Ⅰ)转移质粒pBS-TK-AMA1,并在真核细胞中表达,本试验以pBS-TK重组质粒为载体,插入犬新孢子虫AMA1基因.其中pBS-TK重组质粒是含有FHV-1TK基因的5(2000 bp)和3(1700 bp)同源臂、pCAGGs载体中含有启动子和终止信号的表达盒的pBluesciptⅡ-SK(-)载体.通过转染试剂PEI将pBS-TK-AMA1转移载体转染至293T细胞,以制备的鼠抗犬新孢子虫AMA1蛋白的特异性抗体为一抗,应用IFAT和western blot进行鉴定.结果显示,构建的病毒转移载体pBS-TK-AMA1可以在293T细胞内获得表达,表达蛋白分子量为68kDa.本试验为犬新孢子虫AMA1基因的猫重组疱疹病毒Ⅰ型载体疫苗的研制奠定了基础.
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