【摘 要】
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组织蛋白酶D (cathepsin D,EC 3.4.23.5)是一种天冬氨酸肽链内切酶,广泛存在于生物界中,具有多种生物功能.通过同源克隆方法和cDNA末端快速扩增技术(RACE),首次获得大珠
【机 构】
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中国水产科学研究院南海水产研究所 广东广州 510300
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组织蛋白酶D (cathepsin D,EC 3.4.23.5)是一种天冬氨酸肽链内切酶,广泛存在于生物界中,具有多种生物功能.通过同源克隆方法和cDNA末端快速扩增技术(RACE),首次获得大珠母贝组织蛋白酶D基因(pm CD)的cDNA全长序列1742bp,其中5UTR38bp,3UTR 531bp,开放阅读框1173bp,共编码390个氨基酸.序列分析结果表明,pm CD编码的蛋白质分子量约为41.9 KDa,等电点约7.57；其蛋白结构可分为N*端信号肽序列(Met1-Ala18),前体蛋白域(Leu19-Lys47)和成熟蛋白域.同源性分析表明,pm CD与其他物种的组织蛋白酶D具有较高相似性；结合系统发育分析结果可证明pm CD属于天冬氨酸蛋白酶家族.pm CD在大珠母贝的闭壳肌、性腺、肝胰脏、外套膜和鳃中都有表达,且在性腺中表达量最高,肝胰脏中其次.经哈维氏弧菌(V.harveyi)刺激六小时后,pm CD在性腺和鳃中的表达水平明显下降,而其表达量在肝胰脏中有所上升；经过低盐和高盐海水应激六小时后,pm CD的表达水平在性腺和鳃中明显下调；在低盐环境下,pm CD在肝胰脏中的表达水平显著上调(P＜0.5),而在高盐环境下,其表达量下调.
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