论文部分内容阅读
目的:应用人肺腺癌细胞研究传统化疗药物顺铂与EGFR-TKI药物吉非替尼不同序贯用药对细胞生物行为学的影响，探讨二者序贯用药增效在肺腺癌细胞的可能的机制。方法:体外培养EGFR基因野生型的人肺腺癌细胞株A549及其耐顺铂细胞株A549/DDP,EGFR基因突变阳性的人肺腺癌细胞株PC-9及其耐吉非替尼细胞株AB11;光镜下观察细胞形态;应用MTT法测定不同细胞株对顺铂及吉非替尼的生长抑制率，应用MTT法检查不同加药顺序处理后肺癌细胞株生长曲线;应用Transwell小室实验测定不同加药顺序处理后肺癌细胞株侵袭能力的改变;应用microRNA表达谱芯片技术，筛选不同加药顺序处理后肺癌细胞株的microRNA表达谱变化，比较其差异，并行real-time PCR验证芯片结果。结果:A549细胞呈三角形、短梭形或多角形，细胞核呈圆形或椭圆形，偏心位，多伪足，细胞大小均匀;MTT法检测顺铂对A549细胞的IC50为0.97ug/ml，对A549/DDP细胞的IC50为7.20ug/ml，对PC9细胞的IC50为1.24ug/ml，对AB11细胞IC50为4.27ug/ml;流式细胞仪检测不同加药顺序处理后四株细胞生长曲线，实验组较对照组细胞有生长缓慢的趋势，但两组间无统计学差异;经real-time PCR验证，miR-338-5p在4株肺腺癌细胞实验组中均高表达，并目表达量有2倍以上差异，结果均与microRNA基因芯片结果一致。结论:吉非替尼序贯顺铂较顺铂序贯吉非替尼更能抑制人肺腺癌细胞株体外增殖，目肺癌细胞凋亡率降低、体外侵袭性增强;miR-338-5p在吉非替尼序贯顺铂组肺腺癌细胞株中的表达水平均显著高于顺铂序贯吉非替尼组;miR-338-5p可能与铂类化疗药与EGFR-TKI不同用药顺序所导致肺癌临床疗效差异有关，为进一步研究化疗-EGFR-TKI个体化序贯用药的进一步研究提供了实验依据和理论基础。