【摘 要】
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[研究目的] 研究脾虚对大鼠小肠结构及基因表达谱的影响,完成相关生物信息学分析。[方法]采用SD大鼠,复制利血平脾虚模型,设正常组与脾虚组,造模7天后扑杀,采集十二指肠、空肠、回肠,其中一部分固定、石蜡切片、H.E.染色,观察肠黏膜形态变化,并检测肠绒毛长度、隐窝深度、上皮淋巴细胞数; 另一部分冻存,提取mRNA,采用大鼠全基因组芯片研究脾虚大鼠空肠基因表达变化,并用荧光定量PCR法验证免疫反应相
【机 构】
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中国农业大学动物医学院中兽医实验室,北京 100193 中华人民共和国农业部兽用化药和中草药创制与评价重点开放实验室,北京 100193
【出 处】
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第五届北京畜牧兽医领域青年科技工作者“新思想、新观点、新方法”论坛
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[研究目的] 研究脾虚对大鼠小肠结构及基因表达谱的影响,完成相关生物信息学分析。[方法]采用SD大鼠,复制利血平脾虚模型,设正常组与脾虚组,造模7天后扑杀,采集十二指肠、空肠、回肠,其中一部分固定、石蜡切片、H.E.染色,观察肠黏膜形态变化,并检测肠绒毛长度、隐窝深度、上皮淋巴细胞数; 另一部分冻存,提取mRNA,采用大鼠全基因组芯片研究脾虚大鼠空肠基因表达变化,并用荧光定量PCR法验证免疫反应相关差异基因表达,通过GeneSpdng GX 10.0分析软件完成分类(Gene Ontology)和基因网络图(net)。[结果]与对照组比较,脾虚组大鼠的体重显著下降; 空肠黏膜结构严重损伤,十二指肠,空肠与回肠绒毛长度、隐窝深度,均出现不同程度的降低; 脾虚空肠基因表达谱发生改变,筛选出脾虚组免疫反应相关差异基因12个,并进行验证,验证结果表明芯片结果数据可靠。其中天然免疫相关基因5个,并制作基因网络图net分析预测,脾虚组以TLR2与TLR4为中心交化显著,TLR2可能通过刺激产生TNF,下调补体C3从而下调免疫反应,而Mx2目前未发现与其他差异基因存在联系。[结论] 脾虚导致大鼠空肠黏膜结构损伤,以致其黏膜免疫功能受损,降低了免疫相关基因的表达量,特别是天然免疫相关基因,以TLR2,4为主。
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