【摘 要】
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[目的]为了更好地了解性信息素结合蛋白(pheromone binding proteins,PBPs)在桃蛀螟Conogethes punctiferalis(Guenée)嗅觉识别过程中的作用,明确其与配体化合物的结合
【机 构】
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北京农学院植物科学技术学院,北京102206山西农业大学林学院,山西太谷030801
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[目的]为了更好地了解性信息素结合蛋白(pheromone binding proteins,PBPs)在桃蛀螟Conogethes punctiferalis(Guenée)嗅觉识别过程中的作用,明确其与配体化合物的结合特性.[方法]本研究利用RT-PCR结合RACE方法克隆了桃蛀螟一个性信息素结合蛋白基因；采用real-time PCR方法分析了该蛋白在桃蛀螟不同发育阶段及雌雄蛾间的表达差异；利用荧光竞争结合实验对Cpun-PBP1蛋白与16种配基化合物的结合特性进行了分析.[结果]克隆了一个桃蛀螟性信息素结合蛋白基因,命名为Cpun-PBP1(GenBank登录号：KP027486).Cpun-PBP1开放阅读框全长510bp,编码169个氨基酸,预测分子量为19.12kDa,等电点为5.09,N-末端包括由起始位置开始的30个氨基酸组成的信号肽.蛋白特征分析显示,该氨基酸序列具有昆虫气味结合蛋白的典型特征,即含有6个保守的半胱氨酸残基.Cpun-PBP1在桃蛀螟成虫阶段表达量最高,且几乎全部在触角中表达,卵期微量表达,幼虫期和蛹期均不表达.通过构建Cpun-BP1原核表达载体,诱导并获得Cpun-PBP1重组蛋白.荧光竞争结合实验对2种性信息素组分和14种寄主植物挥发物的结合力发现,Cpun-PBP1不但能有效地与桃蛀螟性信息素组分(顺-10-十六碳烯醛和十六醛)结合,结合常数分别为7.32和9.39μmol/L；还能与8种寄主植物挥发物有效结合；其中,与莰烯的结合能力最强,结合常数为3.76μmol/L.[结论]推测Cpun-PBP1在桃蛀螟感受性信息素和寄主植物挥发物的过程中发挥着双重作用.
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