人HMGB1的分子改建及原核表达

来源 :中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zs297481492
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  目的:该实验通过人HMGB1突变体的构建及目的蛋白的表达与鉴定,为进一步通过HMGB1突变体蛋白与天然HMGB1竞争结合相应受体面抑制其致炎效应奠定了基础,有望为抗炎治疗提供新型候选制剂,而且有助于揭示HMGB1分子发挥作用的关键区域。方法:在已成功克隆和表达人HMGB1的基础上,采用一步反向PCR致突变法构建人HMGB1 cDNA的六个突变体,并分别克隆于原核表达载体pQE-80L上,表达六个相应的重组HMGB1突变体蛋白,并经Western blot鉴定。结果:获得人HMGB1 cDNA的六个突变体,并成功构建到原核表达载体pQE-80L上,诱导表达且经Western blot鉴定了目的蛋白。结论:成功构建人HMGB1突变体,并进行了目的蛋白表达的鉴定,为进一步研究HMGB1的生物学功能奠定了基础。
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