目的:评价不同PCR方法检测胆囊结石患者胆汁和结石中纳米细菌(NB)的临床价值。方法:对30例结石标本、43例胆汁标本采用培养物间接免疫荧光染色(CIIFS)、透射电镜扫描和PCR技术,检测胆汁和结石中的纳米细菌。结果:胆汁、结石培养3-4周后出现肉眼可见白色沉淀聚集,阴性对照未见生长,确证NB存在于胆囊结石患者胆汁、结石中,并能体外培养。NB在荧光显微镜下呈散点状或聚集成簇状绿色荧光,阴性对照则未见绿色荧光。NB在电镜下呈球状或杆状,菌体外周可见大量矿化物,呈毛刺状,表面附着大量针状结晶。PCR引物1、2扩增片段长度约为500bp、400bp左右,阴性对照组均未检出NB。引物1、引物2、CIIFS检测阳性率分别为56.1%、86.4%和54.5%,对比评价表明引物1特异性更高,与CIIFS结果一致率高,阳性率无统计学差异(P>0.05),引物1敏感性为75.0%,特异性为66.7%,阳性预测价值为73.0%,阴性预测价值为69.0%。进一步对比研究发现,引物1原始组阳性率为29.6%,培养组阳性率为50%,培养后可明显提高NB的检出率(P<0.05)。引物1结石组阳性率为46.7%,胆汁组阳性率为63.9%,阳性率无统计学差异(P>0.05)。结论:PCR引物1检测胆囊结石患者NB与CIIFS有较高的一致性,与以往研究一致,且培养后可明显提高NB的检出率,为NB相关疾病的检测提供了一种快速、可靠的方法,具有重要的参考价值。