快速检测牛产肠毒素大肠杆菌的多重PCR方法的研究

来源 :中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aini826611
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产肠毒素大肠杆菌(Enterototxigenic,EscherichiaColi,ETEC)是造成人和动物腹泻的主要病原之一,也是造成新生乳用犊牛腹泻的主要原因,一种ETEC可能产生一种或者多种肠毒素.根据产肠毒素大肠杆菌产生的两种主要毒素(ST和LT)的基因序列,设计两对聚合酶链式反应(PCR)引物,建立多重PCR方法.该方法仅用4.5小时即可检测出导致犊牛腹泻的产肠毒素大肠杆菌菌株,具有敏感毒高、特异性强和检测速度快等特点.本试验的目的是用所建立的多重PCR方法来确定ETEC在导致犊牛腹泻中的作用.采用该方法对乳用犊牛的203个腹泻试样进行了检测,结果,用传统的分离培养方法得到的203株典型大肠杆菌中有135株为ETEC;其中LT阳性为105个,ST阳性为126个,LT+ST阳性的为96个,阳性率为66.5﹪.而采用直接从粪便中提取PCR模板的方法进行PCR,检测到146个犊牛粪便为ETEC阳性,其中LT阳性为112个,ST阳性为137个,LT+ST阳性为103个,阳性率为71.9﹪,明显高于传统的检测方法。
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