【摘 要】
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以毛白杨(Populis tomentosa)叶片为材料、用CTAB方法提取基因组DNA，并以其为模板用PCR技术扩增愈伤诱导表达启动子winp序列并插入克隆载体。测序结果表明该启动子序列长为731bp。与NCBI GeaBank登注的(Populus trichocarpa×Populus deltoides)的愈伤诱导表达启动子的DNA序列比较，具有97％相似性。将该启动子与GUS报告基因融合
【机 构】
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北京林业大学生物科学与技术学院，北京 100083
【出 处】
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2006年全国博士生学术论坛——林业及生态建设领域相关学科
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以毛白杨(Populis tomentosa)叶片为材料、用CTAB方法提取基因组DNA，并以其为模板用PCR技术扩增愈伤诱导表达启动子winp序列并插入克隆载体。测序结果表明该启动子序列长为731bp。与NCBI GeaBank登注的(Populus trichocarpa×Populus deltoides)的愈伤诱导表达启动子的DNA序列比较，具有97％相似性。将该启动子与GUS报告基因融合构建成二元植物表达载体pWinp-GUS并转化农杆菌LBA-4404后用叶圆片农杆菌浸染法浸染转化杨树和烟草。经瞬时表达实验检测，该启动子具有表达活性。经染色显示在损伤处明显地显示出GUS基因表达时特有的蓝色，而在未损伤的部位未见有GUS基因表达；对照叶片在损伤处和未损伤处均未见有GUS基因表达所显现的颜色。用生物信息学方法对该启动子分析结果表明，该启动子序列中富含植物激素响应和光响应的保守DNA序列以及机械损伤响应和病原菌侵入的锌指型转录因子WRKY结合序列。
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