烯丙孕素在猪肝脏和脂肪中的残留消除研究

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【目的】烯丙孕素是一种合成的孕激素,其作用机理类似于孕酮刺激乖体上的受体,抑制卵泡刺激素和促黄体生成素的生成,进而阻断动物的发情和排卵。本研究旨在阐明烯丙孕素在猪肝脏和脂肪中的残留消除规律,从而为其休药期的制定提供数据支持。【方法】将健康母猪32头分成8组,每组4头,设置1组为空白对照组,另外7组为给药组。给药组母猪每日口服给药1次(20mg/日/头,连用18日,相当于0.2mg/kg B.W.)。给药组分别在停药的6h,5 d,10d,15d,20 d,30 d和60d后各宰杀一组,取肝脏和脂肪组织。样本经提取净化之后,采用UPLC-MS/MS检测。以0.1%甲酸水溶液和甲醇:乙腈(1:1 v/v)为流动相,采用梯度洗脱方式经Phenomenex Kinetex 2.6μm C18(50×2.1μm)色谱柱分离,质谱检测采用电喷雾正离子(ESI+)模式,多反应监测模式(MRM)。采集的数据由WT1.4软件计算休药期。【结果】采用UPLC-MS/MS成功建立猪肝脏、脂肪中烯丙孕素的残留检测方法,线性范围:1100μg/kg,R2>0.99,检测限(LOD)和定量限(LOQ)分别是0.5μg/kg和1.0μg/kg。肝脏和脂肪组织在添加浓度1.0、4.0、8.0μg/kg时,回收率分别位于72.7106.9%和69.993.1%,批内和批间变异系数均小于5%。停药后第5天,猪肝脏组织中烯丙孕素残留量均低于最大残留限量(MRLs=4.0μg/kg);停药后第10天,猪脂肪组织中烯丙孕素残留量均低于方法的定量限(LOQ=1.0μg/kg)。说明烯丙孕素在肝脏中消除较快,而在脂肪中消除相对较慢。【结论】用欧盟专业兽药残留分析软件WT1.4对本研究中获得的脂肪组织中烯丙孕素残留数据进行休药期的计算,得出烯丙孕素的休药期为18天。
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