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为了建立黑曲霉原生质体介导的转化系统,以A.niger N402为出发菌株,研究了菌龄、渗透压稳定剂、酶解系统、酶解时间对黑曲霉原生质体形成的影响。结果表明,培养16h的菌丝最适合原生质体的制备,选择0.6 mol/L KCl为渗透压稳定剂,1%纤维素酶+1%蜗牛酶+1%溶壁酶为酶解系统,30℃酶解2~4h,原生质体形成量与再生率最高。在PEG和CaCl2存在条件下,质粒pGLABiPlhph转化原生质体,每微克DNA可获得6~8个转化子。