【摘 要】
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将本实验室分离保存的NA-1株鹅副粘病毒经SPF鸡胚增殖,收集鸡胚尿囊液进行病毒纯化,提取病毒基因组RNA。参考GenBank已收录的鹅副粘病毒ZJ1株基因组序列,设计了8对特异性引物
【机 构】
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吉林大学畜牧兽医学院动物重要病原与疫病研究室 长春 130062
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将本实验室分离保存的NA-1株鹅副粘病毒经SPF鸡胚增殖,收集鸡胚尿囊液进行病毒纯化,提取病毒基因组RNA。参考GenBank已收录的鹅副粘病毒ZJ1株基因组序列,设计了8对特异性引物,RT-PCR法分别特异性的扩增出病毒各基因片段,并将各目的基因片段回收纯化,克隆PGEM-T载体,转化大肠杆菌DH5α,小提质粒选取阳性克隆酶切鉴定,进行序列测定分析。将鹅副粘病毒NA-1株全基因组核苷酸序列进行同源性比较。结果表明,鹅副粘病毒NA-1株全基因组基因与各地代表株核苷酸同源性81.2％~91.3％。同时根据各毒株F基因开放阅读框前389个核苷酸序列绘制出系统发育进化树,表明鹅副粘病毒NA-1株与SF02和QY97病毒株同属于基因Ⅶ型,不同于基因Ⅸ型的国家标准株F48E9和基因Ⅱ型的Lasota传统弱毒株。
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