[目的]磺胺类药物在动物源性食品中的残留很容易诱导出现耐药菌,且残留的药物对人类的健康具有很大的威胁。本实验制备了一种磺胺类药物广谱识别性抗体,建立了一种直接竞争化学发光免疫法,对鸡肉中的30种磺胺类药物进行残留检测。[方法]将磺胺二甲氧嘧啶与牛血清白蛋白偶联合成免疫原,通过常规免疫法制备了一种单克隆抗体。将磺胺嘧啶与辣根过氧化物酶偶联合成了一种酶标物。利用方阵滴定法筛选出抗体和酶标物的最佳工作浓度,在不透明酶标板上建立起一种直接竞争化学发光免疫法,对30种磺胺类药物进行检测,计算该方法对各个药物的交叉反应率、半数抑制浓度(IC₅₀)和检测限(IC₁₀)。同时利用YASARA软件模拟构建30种磺胺药的3D构象和结构参数,对该方法的检测参数进行初步解释。[结果]该抗体可同时识别30种磺胺类药物,交叉反应率范围为13%-176%,对其他类药物的交叉应用率均低于1%。计算模拟结果显示,各药物的3D构象、结构二面角、分子体积、核心结构电量分布等参数均对抗体/药物的结合产生影响,它们的综合作用决定了对各药物的交叉反应率,但它们的作用占比尚不明确。由于使用了1-咪唑-1-基苯酚增强的鲁米诺/H₂O₂发光系统,该方法对30种磺胺类药物的检测限(IC₁₀)范围为1.3-47pg/mL。30种药物在空白鸡肉样品中的添加回收率为72%-98%。[结论]本实验建立的直接竞争荧光免疫法操作简单,灵敏度高,可以检测肉组织中痕量的磺胺类药物残留,可以用于此类药物的常规检测,对保障动物性食品安全,维护消费者健康具有重要意义。