目的：DC细胞递呈抗原促使CIK细胞初始活化，ICOS基因转染活化的CIK细胞，延长CIK细胞的体外存活时间及增强CIK细胞的抗胆囊癌作用。 方法：从人外周血细胞中分离得到单个核细胞，经IFN-γ、IL-2、IL-4、GM-CSF及抗人CD3单抗等培养刺激后获得CIK细胞及DC细胞；RT-PCR法从T细胞中获取ICOS基因的全长，将其导入腺病毒载体中构建含ICOS基因的腺病毒载体，以EGFP基因作为对照；将含ICOS基因的腺病毒载体与CIK细胞共同培养获得CIK-ICOS细胞，以单纯CIK细胞及CIK-EGFP组为对照观察转基因后的CIK细胞体外生长情况；将CIK-ICOS基因与DC-胆囊癌抗原共同培养，MTT法观测杀伤效果；ELISA试剂盒观察转基因后的CIK细胞上清液中各种细胞因子的表达；RT-PcR及免疫组化观察ICOS基因转染是否成功；胆囊癌细胞株200万u/只皮下致瘤构建胆囊癌小鼠的动物模型，分四组，一周后瘤内注射经Dil荧光标记的CIK细胞、CIK-ICOS细胞、CIK-EGFP细胞及生理盐水，观察一周后的不同组细胞的杀伤效果。 结果：转基因后的CIK细胞体外存活时间较对照组有所延长，且转基因后的CIK细胞与对照组相比其在肿瘤细胞的杀伤作用及细胞因子IFN-γ的分泌上均较对照组有显著增强，体内动物实验证实转基因后的CIK细胞在抗胆囊癌的生长方面较对照组有显著增强。 结论：ICOS基因转染CIK细胞后能在体外延长其存活时间及增强其抗胆囊癌的免疫效应，并能在小鼠体内抑制胆囊癌的生长速度，为胆囊癌的免疫治疗提供新的思路。