【摘 要】
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目的 构建以多孔β磷酸三钙支架复合Ⅰ型胶原三维培养大鼠主动脉血管内皮细胞的组织工程骨,初步探讨其在体外和体内的成血管效应.方法 采用血管外翻酶消化法分离SD大鼠胸主动脉血管内皮细胞,与Ⅰ型胶原混合后接种至多孔β磷酸三钙支架上,构建以多孔β磷酸三钙支架复合Ⅰ型胶原三维培养大鼠主动脉血管内皮细胞的组织工程骨.以血管内皮细胞和多孔β磷酸三钙支架共培养为对照组,观察内皮细胞在共培养体系中的增殖、活性和内分
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院骨外科
【出 处】
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中华医学会第十八届骨科学术会议暨第十一届COA国际学术大会
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目的 构建以多孔β磷酸三钙支架复合Ⅰ型胶原三维培养大鼠主动脉血管内皮细胞的组织工程骨,初步探讨其在体外和体内的成血管效应.方法 采用血管外翻酶消化法分离SD大鼠胸主动脉血管内皮细胞,与Ⅰ型胶原混合后接种至多孔β磷酸三钙支架上,构建以多孔β磷酸三钙支架复合Ⅰ型胶原三维培养大鼠主动脉血管内皮细胞的组织工程骨.以血管内皮细胞和多孔β磷酸三钙支架共培养为对照组,观察内皮细胞在共培养体系中的增殖、活性和内分泌功能变化.制作SD大鼠皮下植入模型,将构建的组织工程骨植于大鼠背部皮下,2周和4周后取出标本,采用HE染色和CD31免疫组化染色观察比较这两种组织工程化骨在大鼠体内的血管化效应.结果 与对照组相比,CCK8显示培养的第4天和第7天,大鼠主动脉血管内皮细胞在实验组的增殖更多,差距有统计学意义(P<0.05).Live/Dead染色显示实验组的血管内皮细胞活性更强(P<0.05).ELISA显示内皮细胞在实验组中分泌的VEGF和NO更高.体内植入标本HE染色示构建的以多孔β磷酸三钙支架复合Ⅰ型胶原三维培养大鼠主动脉血管内皮细胞的组织工程骨有较好的组织相容性.植入2周和4周的CD31染色示这一组织工程骨与对照组相比形成的血管密度更高(P<0.05).结论 多孔β磷酸三钙支架复合Ⅰ型胶原三维培养大鼠主动脉内皮细胞构建的组织工程化骨具有较好的生物相容性.多孔β磷酸三钙支架复合Ⅰ型胶原三维培养大鼠主动脉内皮细胞能促进内皮细胞的增殖、活性和内分泌功能,具有更好的体内成血管效应.
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