成体西藏小型猪胰岛体外分离与纯化的研究

来源 :2011东莞第二届国际小型猪学术论坛暨大型实验动物生物医药研究应用研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lgdtmz
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  目的:确定成体西藏小型猪胰岛体外分离、纯化的理想条件,为异种移植治疗糖尿病提供高质量的胰岛。方法:对比不同质量浓度(1g/1,2g/1,3g/1,4g/1)和同一质量浓度条件下不同时间点(0min,l5min,30min,45min,60min,75min,90min)胶原酶分离获得胰岛的数量和效果。使用Ficoll400密度梯度离心、淋巴分离液分离、离心、静置4种方法纯化分离胰岛悬液,比较最终收集到的胰岛数量和效果。结果:确定了不同质量浓度的胶原酶获取胰岛的最佳时间,胶原酶l g/l组为45rain,2g/1、3g/1和4g/1组为30min,各组在最佳时间点获得胰岛的数量最多的为1g/1组,各组在最佳时间点获得的胰岛形态完整,具有活性;4种纯化方法中,获得的胰岛数量由多到少依次为静置>离心>淋巴分离液离心>ficoll400密度梯度离心,4种方法获得的胰岛均具有活性。结论:在组织块剪碎消化的情况下,胶原酶质量浓度1g/1、消化时间45min的分离条件可获得数量较多的胰岛,静置的纯化手段收集到的胰岛数量最多。
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