【摘 要】
:
大肠杆菌(E.coli)是引起奶牛乳房炎的主要环境病原菌,能引起乳腺组织损伤和细胞死亡.本研究中我们探索益生菌(L.rhamnosus GR-1)减弱大肠杆菌引起的奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)炎症反应及损伤的机制.结果 显示L.rhamnosus GR-1能降低E.coli感染的BMECs内TLR4,NOD1和NOD2的mRNA表达.免疫荧光和Western blot结果表明L.rhamnosu
论文部分内容阅读
大肠杆菌(E.coli)是引起奶牛乳房炎的主要环境病原菌,能引起乳腺组织损伤和细胞死亡.本研究中我们探索益生菌(L.rhamnosus GR-1)减弱大肠杆菌引起的奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)炎症反应及损伤的机制.结果 显示L.rhamnosus GR-1能降低E.coli感染的BMECs内TLR4,NOD1和NOD2的mRNA表达.免疫荧光和Western blot结果表明L.rhamnosus GR-1能显著降低BMECs中NLRP3和Caspase-1蛋白表达,而ASC在感染呈现相反趋势.同时我们检测到L.rhamnosus GR-1的添加能显著降低E.coli引起的炎症因子IL-1β,-6,-8,-18和TNF-α的mRNA表达,同时提高抗炎因子IL-10的表达.研究发现提前添加L.rhamnosus GR-1能显著降低大肠杆菌在BMECs上的粘附力,同时显著改善E.coli感染的BMECs超微结构损伤.我们结论表明,L.rhamnosus GR-1降低E.coli引起的炎症反应和细胞损伤,主要是通过降低E.coli的粘附及降低E.coli引起的细胞形态学和超微结构损伤,并且通过促进TLR2和NOD1的协同及抑制ASC非依赖途径的NLRP3炎性体激活来限制E.coli引起的BMECs有害炎症反应.本研究为探索益生菌治疗病原菌引起的奶牛乳房炎提供了理论依据和参考价值.
其他文献
作为当前广泛使用的转基因动物生产工具,CRISPR-Cas9系统已被应用于小鼠、猪、山羊及猴等物种.同时,多种针对于Cas9蛋白本身的突变及相应的转基因策略已经被提出以减少目前最广泛关注的脱靶效应问题,并取得了瞩目成绩.在本研究中,我们首次报道了利用单个Cas9缺口酶(Cas9n)来诱导在筛选出的位点上的基因插入并生产出了全基因组范围内没有可检测到的微小插入缺失(indels)的转基因牛.首先,我
用生物反应器生产医学临床应用的药用蛋白而言,转基因鸡较转基因家畜更有优势,因为鸡具有世代间隔短、后代繁殖快、产蛋量高等优点,在生物制药领域有着美好的应用前景.尤为显著的是,母鸡蛋清中由外源基因编码的蛋白质的沉积作用,可以使转基因生物材料产量最优化.本研究以PCR扩增鸡卵清蛋白启动子和EGFP基因;构建重组慢病毒表达载体.用重组慢病毒载体分别转染293FT细胞,将产生的重组慢病毒通过浓缩后直接注射至
脂多糖可刺激肉鸡产生免疫应答,使淋巴细胞产生炎性因子,进而诱发应激反应,引起炎症,从而引发疾病,降低肉鸡的生产性能.酸性蛋白酶被公认为是安全高效、最有发展和应用前景的饲料添加剂之一.本试验旨在研究脂多糖刺激下酸性蛋白酶对肉鸡肠道pH的影响,并判断其是否可以拮抗脂多糖对肉鸡产生的应激反应.选取1日龄AA肉仔鸡288只,随机分为4组(每组4个重复,每个重复12只):对照A组饲喂基础饲粮,对照B组腹腔注
牦牛作为青藏高原地区重要物种资源,通过辅助繁殖技术提高其繁殖性能对我国"丝绸之路经济带"畜牧业的发展至关重要.本研究检测牦牛卵母细胞体外成熟、体外受精胚胎发育及睾丸组织发育中EGF、EGFR、IGF-1、IGF-1R的表达水平;在体外冻精获能、卵母细胞成熟及胚胎发育中加入生长因子分析精子活性或胚胎发育潜能,并从基因和蛋白水平分析凋亡相关基因Bax、Baxi、BcL-2、HSP70、HSP90、Su
作为人和动物生长发育必需的微量元素,硒对肠粘膜免疫系统产生重要的影响.本课题以雏鸡为试验动物,通过饲喂低硒饲料的方法构建了硒缺乏动物模型,运用iTRAQ-LCMS/MS质谱联用技术定量鉴定及筛选硒缺乏雏鸡十二指肠粘膜差异蛋白.共鉴定3448个蛋白质,包括20667个肽,其中在7d、21d、35d分别有67、127、119种已知差异表达蛋白.通过生物信息学方法对差异蛋白分类并进行功能分析发现,差异蛋
本研究对冻融前后绵羊精子的活动率、活力、胞内活性氧含量(ROS)和ATP含量做了检测,并结合二维凝胶电泳技术对绵羊精子冻融前后的全蛋白做了比较分析.结果 发现,与鲜精对比,冻融组精子的活动率、活力和ATP含量显著降低(P<0.001),而胞内ROS含量显著升高(P<0.001);差异蛋白质斑点经MALDI-TOF-TOF MS质谱鉴定,并结合NCBI搜库,共得到25个蛋白质氨基酸序列.经生物信息学
本研究目的 是探讨离子组学与缺硒诱导的心肌坏死的关系.试验随机将180只1日龄鸡分为硒缺乏组(L组)和对照组(C组),C组饲喂硒含量为0.2 mg/kg的全价日粮,而L组饲喂硒含量为0.033 mg/kg的硒缺乏日粮.于55天将两组鸡进行剖杀,分别采集血液和心肌组织.检测血清中的心肌损伤标志物(AST、LDH和CK-MB),同时使用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定心肌中26种元素Li、B
本实验是对含有人β防御素3 (HBD3)的转基因(GM)牛奶对小鼠进行90天饲喂后研究其对小鼠胃肠道(GI)的影响。检测主要指标包括GM牛奶消化性,一般生理指标检测包括体重、饲料利用率、血液生化指标、脏器指数等,胃排空功能,肠道渗透性,小鼠肠道菌群组成和水平基因转移的可能性(HGT)。我们将实验的重点放在了对肠道的影响,因为肠道是最早接触食物并且在代谢、营养吸收和调节宿主免疫上发挥重要作用。然而,
缺硒能够导致哺乳动物骨骼肌的钙流失及肌肉钙化.禽类缺硒是否能够引起相似的病理变化及其机理还不得知.本实验在通过饲喂鸡缺硒饲料,并复制鸡缺硒性骨骼肌损伤模型的基础上,检测骨骼肌钙浓度及分布.另外,将鸡胚成肌细胞和鸡胚骨骼肌内硒蛋白W (Selw)表达进行干扰,以检测Selw在鸡缺硒性骨骼肌损伤中的钙调控作用.结果 显示,缺硒后鸡骨骼肌发生了典型的钙流失(P<0.05),而未见明显的骨骼肌钙化现象.同
奶牛乳热是严重影响奶牛生产性能的一种营养代谢性疾病。本实验通过3种蛋白质组学技术平台进行分析,旨在于通过多种技术平台对乳热进行分析以完整蛋白质组学方面的研究。实验根据奶牛血浆钙浓度将奶牛分为实验组和对照组。应用2D-DIGE/MALDI-TOF-MS、iTRAQ、SELDI-TOF-MS技术对两组奶牛样品进行差异表达蛋白的筛选和鉴定,并结合生物信息学分析对实验结果进行分析。实验共得到61个差异表达