【摘 要】
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目的 :探索细胞外基质维度对树突状细胞(dendritic cells, DCs)细胞形态的影响,以期深入理解DCs的免疫调节功能。方法 :分离人外周血中的单核细胞,经重组人白介素-4 (rh IL-4
【机 构】
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贵州医科大学生物与工程学院; 贵州医科大学基础医学院; 贵州省免疫细胞与抗体工程研究中心/贵州医科大学生物与医学工程重点实验室;
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目的 :探索细胞外基质维度对树突状细胞(dendritic cells, DCs)细胞形态的影响,以期深入理解DCs的免疫调节功能。方法 :分离人外周血中的单核细胞,经重组人白介素-4 (rh IL-4)和重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)诱导获得未成熟树突状细胞(immature DCs,imDCs),imDCs经干扰素γ和脂多糖诱导分化为成熟树突状细胞(mmature DCs, mDCs)。利用Fibrin细胞外基质处理imDCs和mDCs,分别处理1h、2h、3h、4h、5h、6h、9h和12h,不加力处理的细胞作为对照组,细胞松弛素(cytochalasin D,BD)处理细胞作为阴性组,用罗丹明标记的鬼笔环肽标记细胞骨架F-actin、DAPI标记细胞核,共聚焦显微镜检测细胞骨架及细胞形态变化;旋转流变仪检测Fibrin凝固和融化过程中弹性模量和粘性模量的变化,并用共聚焦显微镜拍摄DCs Fibrin凝固和融化过程中细胞形态的变化;细胞电泳仪检测Fibrin细胞外基质处理6h的imDCs和mDCs的细胞电泳率,荧光分光光度计检测细胞膜流动性。结果 :Fibrin细胞外基质维度对细胞形态有明显影响。细胞电泳率,细胞膜流动性分别有上调和下调。并观察到随着Fibrin凝固和融化过程中弹性模量和粘性模量的增加和减少,DCs的形态也发生明显变化。结论 :树突状细胞能感受Fibrin细胞外基质不同维度的变化,继而影响细胞的形态,并且改变了DCs的生物物理学特性,这种改变很有可能影响DCs的正常功能,但是其中的分子机制还不得而知,需要进一步的研究。
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