人胚胎干细胞来源间充质干细胞和骨髓来源间充质干细胞的免疫学特性比较

来源 :首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lalalalalaaa
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  目的:比较人胚胎干细胞来源的间充质干细胞和骨髓来源间充质干细胞(βMSC)的免疫学特性并探讨其相关机制方法:H9人胚胎干细胞(ESC)系购买于WiCell(同意书编号:11-W0039).收集齿槽嵴裂患者(知情同意)髂骨骨髓,通过骨髓贴壁培养分离BMSC.利用RT-PCR、免疫荧光染色、流式细胞分析及体内/外分化实验,鉴定H9 ESC及BMSC的生物学特性.通过拟胚体(EB)贴壁扩增诱导法将H9 ESC分化成间充质干细胞(H9-MSC).运用混合淋巴细胞刺激试验,植物血凝素(PHA)刺激试验和IFN-?刺激试验比较H9-MSC和BMSC的免疫学特性.利用流式细胞分析检测H9-MSC和BMSC在不同浓度IFN-?刺激前后的免疫相关因子表达水平的变化;再利用RT-PCR和real-time PCR方法检测IFN-?刺激前后IFN-?信号通路分子(IFN-?受体,JAK/STAT通路信号分子,CIITA及其下游分子)的表达情况,并通过免疫荧光染色和western blot方法鉴定CIITA蛋白在细胞内的定位及其在核内和胞浆中的表达水平,探讨H9-MSC与BMSC免疫学特性差异的机制.
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