【摘 要】
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壳聚糖(chitosan)是一种具有高密度正电荷并能够与质粒DNA形成颗粒,并在体外携带DNA转染真核细胞的多糖类物质。又由于其具有粘膜粘附性,保护DNA免受Dnase降解的性质,使其成
【机 构】
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中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室; 新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室;
【基金项目】
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国家863计划(No.2001AA213111);国家自然科学基金资助项目(No.30271220)资助。
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壳聚糖(chitosan)是一种具有高密度正电荷并能够与质粒DNA形成颗粒,并在体外携带DNA转染真核细胞的多糖类物质。又由于其具有粘膜粘附性,保护DNA免受Dnase降解的性质,使其成为DNA疫苗粘膜免疫发送介导的选择之一。为了检测小分子壳聚糖能否提高DNA疫苗的粘膜免疫效果,用亚硝酸钠将壳聚糖进行了解聚得到解聚后的小分子壳聚糖(DCH)。经琼脂糖电泳检测DCH与质粒DNA成功包裹形成颗粒,经过小鼠胃液的消化,认为DCH可以一定程度的保护DNA。利用DCH包裹pCMVβ经滴鼻和口服途径进行小鼠的体内表达检测,结果显示DCH可以提高pCMVβ的表达,滴鼻途径效果好于CHI。将CHI和DCH与口蹄疫病毒(foot and mouth disease virus)的DNA疫苗pcD-VPl包裹形成纳米颗粒,通过滴鼻(i.n.)和口服(i.o.)两种不同的粘膜途径在0、14、28 d免疫C57小鼠,分别检测小鼠的特异性针对口蹄疫的生殖道部位的粘膜IgA抗体水平。结果显示经过滴鼻免疫DCH-DNA组的抗体水平显著高于CHI-DNA组和裸DNA组,但是在口服途径DCH-DNA不能显著提高抗体水平,而CHI-DNA组可以显著提高抗体水平。
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