不同浓度FK506对新生大鼠脊髓背根神经元生长的影响

来源 :第七届西部骨科论坛暨青海省骨科年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liuhaiyi123
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  目的:观察并寻找促进新生大鼠脊髓背根神经元生长的最佳FK506浓度.方法:取8只新生SD大鼠的背根神经节,剥除神经外膜,剪成约1mm3大小的碎块,用0.25%胰蛋白酶消化后进行纯化培养,建立体外新生大鼠脊髓背根神经元培养体系.培养96h后,将背根神经元分为:空白对照组(A组)、100pmol/LFK506组(B组)、1nmol/LFK506组(C组)和10nmol/LFK506组(D组).继续培养48h后,通过NF200免疫荧光法观察神经元生长情况,四甲基偶氮哇盐比色法(MTT法)检测细胞活力及逆转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测生长相关蛋白-43信使核糖核酸(GAP-43mRNA)的表达情况.结果:免疫荧光结果显示C组的背根神经元数量和突起的长度生长明显优于A组、B组和D组,B组神经元生长情况优于A组,D组的神经元生长情况明显差于A组.B组的MTT吸光度OD值及GAP-43mRNA的相对表达量高于A组,没有统计学差异差异(P>0.01),C组的MTT吸光度OD值及GAP-43mRNA的相对表达量高于A组和B组,差异有统计学意义(P<0.01),D组MTT吸光度OD值及GAP-43mRNA的相对表达量明显低于A组,差异有统计学意义(P<0.01).结论:1nmol/L浓度的FK506对大鼠脊髓背根神经元生长的促进和保护作用最好;100pmol/L浓度的FK506对大鼠脊髓背根神经元生长具有促进和保护作用;10nmol/L浓度的FK506对神经元的生长具有抑制作用.
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