【摘 要】
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目的：应用RNAi技术,沉默特异性表达于人T淋巴细胞的转录因子GATA3,成功建立GATA3+/-、GATA3-/-基因型T淋巴细胞模型体外培养的试验方法。并在此模型基础上,探讨维生素A促进Th1/Th2失衡修复的发生机制。方法：参照文献,设计并化学合成三对GATA3靶向小干扰RNA片段,瞬时转染至脐血T淋巴细胞,通过荧光倒置显微镜、流式细胞术、Western blotting方法(WB)和实时荧
【机 构】
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四川大学华西公共卫生学院 成都610041
【出 处】
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四川省营养学会2010年学术年会暨妇幼营养专委会成立大会
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目的：应用RNAi技术,沉默特异性表达于人T淋巴细胞的转录因子GATA3,成功建立GATA3+/-、GATA3-/-基因型T淋巴细胞模型体外培养的试验方法。并在此模型基础上,探讨维生素A促进Th1/Th2失衡修复的发生机制。方法：参照文献,设计并化学合成三对GATA3靶向小干扰RNA片段,瞬时转染至脐血T淋巴细胞,通过荧光倒置显微镜、流式细胞术、Western blotting方法(WB)和实时荧光定量RT-PCR(RT-PCR)方法检测沉默效率,构建GATA3+/-、GATA3 -/-基因型T淋巴细胞模型。然后用不同浓度的维生素A (10-4,10-5,10-6,10-7mol/L)进行干预,通过ELISA方法和实时荧光定量RT-PCR方法检测IFN-γ和IL-4表达情况,探讨维生素A对Th1/Th2平衡的影响作用。
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