【摘 要】
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本研究根据GenBank公布的H5N1亚型禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)基因序列设计引物,用RT-PCR方法扩增H5N1亚型禽流感病毒HA基因.将该片段定向插入到笔者所在实验室设计的原核表达
【机 构】
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华南农业大学,动物科学学院,广东,广州,510640
【出 处】
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中国畜牧兽医学会禽病分会第十三次学术研讨会
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本研究根据GenBank公布的H5N1亚型禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)基因序列设计引物,用RT-PCR方法扩增H5N1亚型禽流感病毒HA基因.将该片段定向插入到笔者所在实验室设计的原核表达载体pBCX中,构建重组表达载体pBCX-HA.将阳性质粒转化到大肠杆菌BL-21(DE3)感受态细胞中诱导表达,SDS-PAGE可检测到分子量约为94.7ku的融合蛋白,表达产物占菌体总蛋白的22.5％.同时将重组表达质粒pET32a(+)-HA在同一条件下进行诱导表达,表达产物占菌体总蛋白的18.5％.经蛋白可溶性分析可看出,pBCX-HA融合蛋白主要以可溶形式存在.经Western-blot证实,可溶表达的融合蛋白与H5N1 AⅣ阳性血清具有良好的免疫反应性.
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