一株海带高效降解菌株HZ22的多相分类学鉴定及降解特性研究

来源 :第七届全国微生物资源学术暨国际微生物系统与分类学研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pxz521520
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  在开展海洋微生物资源调查过程中,从海水中分离得到了一个高效降解海带菌群HZ,分析该菌群菌落结构后发现一株疑似新种HZ22,其最相似菌株为Algibacter wandonensis,相似度为97.2%.对该菌株进行了多相分类学鉴定,菌株为Gram-negative细菌,没有鞭毛,细胞平均大小为3.0-4.4μm×0.3-0.5μm.其在MA培养基中生长条件为4-55℃(最适28℃),pH 5.5-8.5(最适pH 7.0-7.5),0-8%NaCl浓度(最适0.5-1.5%).菌株不含flexirubin,但含有carotenoids.菌株G+C%为68.1 mol%.菌株的最主要呼吸醌为甲基萘醌(menaquinone)MK-6,主要脂肪酸为C18:1 ω7c和C16:0,主要极性脂为phosphatidylglycerol(PG),diphosphatidylglycerol(DPG),phosphatidylethanolamine(PE),phosphatidylcholine(PC),1个aminophospholipid(APL),1个unknown aminolipid(AL),4个unknown phospholipids(PL)和3个unknown lipids(L).结合生理生化、表型及基因型比较结果,我们认为菌株HZ22为Algibacter属新种.同时,对于该菌株的海带降解特性进行了初步研究,发现该菌株具有包括褐藻胶裂解酶、淀粉酶、果胶酶、纤维素酶等多种多糖裂解酶,其中褐藻胶裂解酶酶活高达1150±60 U/ml.研究了4种多糖裂解酶与菌株生长状态的关系,发现酶的峰值出现时间相对于细菌生长时间具有较大的滞后性,同时,大量多糖裂解酶的分泌可以促使细菌出现第二个快速生长阶段.研究了菌株的最适发酵条件,发现在pH 7.0,37 ℃及0.5%NaCl浓度的条件下,菌株褐藻胶裂解酶的单位时间产量最高.研究了菌株粗酶液的最佳反应条件,发现在pH 7.5,40℃及0.5%人工海水浓度的条件下,菌株粗酶液中褐藻胶裂解酶的酶活最高.通过部分因子析因实验及中心复合设计实验,确定了对于菌株粗酶液中海藻酸钠裂解酶酶活影响较大的因子为海带粉浓度,NaCl浓度及培养时间.之后,又对该菌株进行了全基因组测序,补洞拼接后得到了仅含10个contig的高质量草图,该菌株基因组上具有9个褐藻胶裂解酶基因分属4个多糖裂解酶家族(polysaccharide lyases families;PL families),其中Aly 5属于PL17家族,该家族目前仅有4个褐藻胶裂解酶被报道,且所有已报道的褐藻胶裂解酶均为褐藻胶寡糖酶,具有极大的应用价值.目前研究结果表明,该菌株在海藻生物质降解利用方面,例如海藻乙醇、海藻寡糖开发等方向上具有极大的研究潜力.
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