呼吸道合胞病毒(RSV)是引起婴幼儿和成人毛细支气管炎的主要病原体,以往研究发现RSV感染可导致哮喘易感性增加,但其机制至今尚未明确。而支气管上皮细胞的结构和功能变化可导致哮喘发病。本研究建立RSV慢性感染人支气管上皮细胞(HBECs)模型,观察该模型对淋巴细胞的活化和增殖作用。首先构建RSV慢性感染HBECs模型,光镜和电子显微镜下观察细胞形态变化,免疫荧光进行模型鉴定并判断感染效率;之后体外分离外周血淋巴细胞,将其分为淋巴细胞组(L)、RSV作用于淋巴细胞组(RL)、正常HBECs与淋巴细胞共培养组(HL)、RSV慢性感染HBECs后与淋巴细胞共培养组(HRL),24 h后分别收获淋巴细胞和共培养上清液,PI染色、流式细胞技术测定淋巴细胞的凋亡率和细胞周期,ELISA检测上清液中IL-4,IFN-r和IL-17的水平。结果:(1)光镜和电镜下均可见部分感染RSV的HBECs晚期出现融合病变。免疫荧光显示细胞内有荧光表达;(2)外周血淋巴细胞分组处理24 h后,HRL组的凋亡率显著高于其余三组(P<0.05)。细胞周期结果显示HRL组的S期细胞数最多(P<0.05),HL组次之,L组和RL组的S期细胞数最少。G1期细胞数则HRL组最少(P<0.05),L组和RL组最多。ELISA检测共培养上清液,HRL组IL-4、IFN-r和IL-17水平显著高于其余三组(P<0.05)。结论:慢性感染RSV后的HBECs可以刺激外周血淋巴细胞增殖,并诱导免疫活化的细胞凋亡,以及促进淋巴细胞因子IL-4、IFN-r和IL-17的释放。